部分去背根后脊髓內Sema3A、NP-1及備用背根節(jié)內NP-1表達的變化.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察在貓部分去背根后,神經生長抑制因子Sema3A在脊髓內表達的時空變化以及其受體neuropilin-1(NP-1)在脊髓、背根節(jié)表達的時空變化,以初步探討神經生長抑制因子與脊髓可塑性的關系。 方法:成年健康雄貓15只分為三組:正常組、手術7天組、手術14天組,每組5只動物。手術組建立單側備用背根模型(即切斷一側L<,1>-L<,5>,L<,7>-S<,2>背根,保留L<,6>背根為備用根),分別于術后7天,14天處死。

2、取各組L<,3>、L<,5>、L<,6>脊髓節(jié)段及一側L<,6>背根節(jié)(正常組取任意一側背根節(jié),手術組取手術側背根節(jié)),在-20℃恒冷箱切片,脊髓橫切,片厚35μm;背根節(jié)縱切,片厚20μm。脊髓用羊抗Sema3A(1:1600)抗體,及羊抗NP-1抗體(1:500);背根節(jié)用羊抗NP-1抗體(1:600)進行免疫組織化學染色,并設置空白對照及置換對照。光鏡下觀察結果,并采用圖像分析系統(tǒng)測量各組Sema3A及NP-1免疫陽性產物在L<,

3、3>、L<,5>、L<,6>脊髓背角淺層的平均光密度值(正常組測任意一側,手術組測手術側);計數L<,6>背根節(jié)NP-1陽性中小神經元數。結果采用單因素方差分析及q檢驗進行統(tǒng)計學分析,若P

4、ma3A、NP-1的免疫陽性產物主要分布于背角淺層的神經元及神經氈內。它們的平均OD值在L<,3>脊髓節(jié)段于手術7天較正常組有所下降(P<0.05),手術14天維持在這一水平(P>0.05);在L<,5>脊髓節(jié)段于手術7天下降(P<0.05),手術14天升高并接近正常組(P>0.05);在L<,6>脊髓背角各時間段均無顯著差異(P>0.05)。 2.單側部分去背根后NP-l在L<,6>背根節(jié)表達的變化 L<,6>

5、背根節(jié)內NP-1的免疫陽性產物分布于部分中、小神經元的胞漿中,在少量的大神經元胞漿中也有分布。另外,能夠觀察到陽性神經纖維。手術側L<,6>背根節(jié)NP-l陽性中小神經元數在手術7天組較正常組減少(P<0.05);在手術14天組較7天組有所增加。 結論: 脊髓部分去傳入后7天、14天,Sema3A及其受體NP-1的表達在L<,3>脊髓背角淺層較正常組下調并維持在低水平;在L<,5>脊髓經歷了先下調后上調的過程;在L<

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