迷迭香酸通過抑制NF-κB活化對抗谷氨酸誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  觀察迷迭香酸(RA)對抗谷氨酸誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用,探討作用機(jī)制與核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)信號通路的關(guān)系。
  方法:
  體外培養(yǎng)PC12細(xì)胞,建立谷氨酸誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡模型。采用MTT法檢測細(xì)胞存活率;Hoechst33258熒光染色觀察細(xì)胞凋亡形態(tài)的改變,碘化丙啶(PI)染色流式細(xì)胞儀檢測分析細(xì)胞凋亡率;Western blot檢測IκBα、p-IκBα蛋白、NF-κB p65蛋白在

2、細(xì)胞漿和細(xì)胞核中表達(dá)變化情況。
  結(jié)果:
  不同濃度谷氨酸(0、4、8、12、16、20 mmol/L)作用PC12細(xì)胞24 h后,細(xì)胞存活率呈劑量依賴性下降,其 IC75大約為16 mmol/L。因此,本實(shí)驗(yàn)以16 mmol/L谷氨酸作為PC12細(xì)胞損傷模型的工作濃度,將后續(xù)實(shí)驗(yàn)分組為:對照組,損傷組(16 mmol/L谷氨酸),RA1組(30μmol/L RA+16 mmol/L谷氨酸),RA2組(60μmol/L

3、RA+16 mmol/L谷氨酸)。16 mmol/L谷氨酸孵育PC12細(xì)胞24 h后,細(xì)胞核形態(tài)出現(xiàn)凋亡小體、細(xì)胞核濃縮或碎塊狀等典型凋亡樣改變,細(xì)胞凋亡率為(28.6±2.5)%;與損傷組比較,RA1組和RA2組細(xì)胞存活率隨RA濃度增加明顯升高(p<0.05),并能減少細(xì)胞凋亡發(fā)生,使其凋亡率分別下降至(18.3±3.7)%、(7.8±1.9)%。16 mmol/L谷氨酸作用PC12細(xì)胞1 h后,細(xì)胞漿中IκBα蛋白和NF-κB p6

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