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![鈾礦塵對(duì)巨噬細(xì)胞毒性作用及TGF-β1表達(dá)的影響.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/cc3b4ae9-1633-4bb5-bde7-2db4e0c052e2/cc3b4ae9-1633-4bb5-bde7-2db4e0c052e21.gif)
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1、目的:探討鈾礦塵作用小鼠巨噬細(xì)胞不同時(shí)間后的細(xì)胞毒性作用及鈾礦塵誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞表達(dá)TGF-β1的影響。
方法:采用小鼠巨噬細(xì)胞系 RAW264.7細(xì)胞株,進(jìn)行體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)分別設(shè)鈾礦塵實(shí)驗(yàn)組和無(wú)粉塵培養(yǎng)基對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組用120μg/ml的鈾礦塵混懸液與RAW264.7細(xì)胞分別作用2、4、8、16、24、32h后,通過(guò)MTT實(shí)驗(yàn)、HE染色、AO/EB染色等方法觀察鈾礦塵對(duì)RAW264.7增殖活性、細(xì)胞形態(tài)及細(xì)胞凋亡的影響;
2、利用比色法測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)上清液中·OH、H2O2及MDA水平的變化;應(yīng)用ELISA法測(cè)定鈾礦塵對(duì)RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)上清液中TGF-β1水平的影響。
結(jié)果:鈾礦塵混懸液作用RAW264.7細(xì)胞2、4、8、16、24、32h后,MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,RAW264.7細(xì)胞增殖活性明顯降低(與對(duì)照組比較,P<0.05),并且隨著染塵時(shí)間的延長(zhǎng),RAW264.7細(xì)胞的存活率逐漸降低;HE染色可見(jiàn),隨著染塵時(shí)間的延長(zhǎng),鈾礦塵組梭型或不規(guī)
3、則型細(xì)胞數(shù)目上升,多核細(xì)胞數(shù)明顯增加,細(xì)胞胞質(zhì)缺失,胞核外露、染色變淺,細(xì)胞形態(tài)變化較大;AO/EB染色發(fā)現(xiàn),鈾礦塵組紅色或橙色的凋亡/壞死細(xì)胞明顯增多,并且隨著染塵時(shí)間的延長(zhǎng),壞死和凋亡細(xì)胞數(shù)目逐漸增加;比色法測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)上清液中·OH、H2O2及MDA含量發(fā)現(xiàn),鈾礦塵組細(xì)胞培養(yǎng)上清液中·OH、H2O2、MDA水平明顯升高(與對(duì)照組比較,P<0.05),并且隨著染塵時(shí)間的延長(zhǎng),其水平持續(xù)升高;ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,鈾礦塵能夠引起RA
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