1、本實驗以苜?；ㄋ帪椴牧险T導出愈傷組織，進行繼代培養(yǎng)和誘導再生植株，旨在研究這一過程中繼代與分化培養(yǎng)條件優(yōu)化、繼代與生根培養(yǎng)基的優(yōu)化。實驗還初步研究了流式細胞法對苜蓿染色體倍性的鑒定，為完善苜蓿DH系的構建提供科學依據(jù)。研究結果如下： ①花藥愈傷繼代培養(yǎng)中MS和N6大量元素培養(yǎng)基交替使用，愈傷組織的增值和顏色要好于單一使用。 ②繼代培養(yǎng)的第1-5代生長素添加量為2mg/l，增值培養(yǎng)階段為0～0.5mg/l，繼代培養(yǎng)第6-1

2、0為1.5-2.5mg/l，添加防褐物質AC 0.8g/l，為花藥愈傷繼代培養(yǎng)較優(yōu)的生長素組合方式。 ③LH用量為0.8-1g/l不僅能增加愈傷組織的生物量，且具有防褐化的作用。 ④分化培養(yǎng)中愈傷組織長出松散的綠點時，要及時將細胞分裂素濃度降到2.0mg/l以下，否則，愈傷較易褐化或形成畸形苗。 ⑤激素、大量元素等因素正交實驗的結果表明，2，4-D和大量元素對愈傷組織體積增加的差異顯著(F>3.096，P<0.0