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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:本實(shí)驗(yàn)建立梗阻性黃疸(OJ)大鼠模型,并對(duì)此模型施行不同的膽汁引流方式—膽汁內(nèi)引流術(shù)和膽汁外引流術(shù)。通過(guò)觀察術(shù)后各組大鼠腸黏膜組織形態(tài)學(xué)變化,檢測(cè)血清中內(nèi)毒素水平、腸黏膜細(xì)胞增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表達(dá)以及腸黏膜組織緊密連接相關(guān)蛋白—閉鎖蛋白和閉鎖小帶蛋白-1(ZO-1)的表達(dá),探討不同膽汁引流方式對(duì)OJ大鼠腸黏膜機(jī)械屏障功能的影響及機(jī)制。從而為臨床上對(duì)OJ患者選擇何種膽汁引流方式提供
2、一定的理論依據(jù)。
方法:將60只SD大鼠采用膽總管結(jié)扎法制作OJ模型,1周后隨機(jī)均分為無(wú)引流組(不行膽汁引流術(shù)),內(nèi)引流組(行膽汁內(nèi)引流術(shù))和外引流組(行膽汁外引流術(shù)),引流時(shí)間為1周。以20只假手術(shù)大鼠為對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)時(shí)間共2周,結(jié)束時(shí)分別用ELISA法、IHC法和Western blot法檢測(cè)各組大鼠血清內(nèi)毒素水平、腸黏膜細(xì)胞PCNA和Caspase-3的表達(dá)和腸黏膜組織閉鎖蛋白及ZO-1的表達(dá),并觀察腸黏膜組織形態(tài)學(xué)改變。
3、
結(jié)果:
1、血清內(nèi)毒素水平的變化:無(wú)引流組和外引流組OJ大鼠血清內(nèi)毒素水平明顯升高,與對(duì)照組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而無(wú)引流組與外引流組間比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;內(nèi)引流組較無(wú)引流組和外引流組明顯下降,基本接近對(duì)照組水平。
2、腸黏膜細(xì)胞PCNA的表達(dá):無(wú)引流組、內(nèi)引流組和外引流組OJ大鼠腸黏膜細(xì)胞PCNA的表達(dá)明顯下降,與對(duì)照組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而內(nèi)引流組和外引流組較無(wú)引流組明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)
4、學(xué)意義;內(nèi)引流組較外引流組亦明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
3、腸黏膜細(xì)胞Caspase-3的表達(dá):無(wú)引流組、內(nèi)引流組和外引流組OJ大鼠腸黏膜細(xì)胞Caspase-3的表達(dá)明顯升高,與對(duì)照組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而內(nèi)引流組和外引流組較無(wú)引流組明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;內(nèi)引流組較外引流組亦明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
4、腸黏膜組織緊密連接相關(guān)蛋白—閉鎖蛋白和ZO-1的表達(dá):與對(duì)照組比較,無(wú)引流組和外引流組OJ大鼠腸
5、黏膜上皮細(xì)胞間緊密連接相關(guān)蛋白—閉鎖蛋白和ZO-1的表達(dá)均明顯降低,且外引流組兩者表達(dá)水平降低尤為明顯,與無(wú)引流組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;內(nèi)引流組的表達(dá)水平明顯高于無(wú)引流組和外引流組,基本接近對(duì)照組。
5、腸黏膜的光鏡表現(xiàn):無(wú)引流組和外引流組OJ大鼠腸黏膜結(jié)構(gòu)破壞,大量或中量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),而內(nèi)引流組OJ大鼠組腸黏膜結(jié)構(gòu)完整,僅見少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。
結(jié)論:膽汁內(nèi)引流對(duì)OJ大鼠腸黏膜機(jī)械屏障具有保護(hù)作用,其機(jī)制可能與膽汁
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