1、【目的】 解脲脲原體(Ureaplasma urealyticum，Uu)是人類泌尿生殖道常見(jiàn)的一種共生微生物，可以存在于健康人群，也可存在于非健康人群。根據(jù)不同的方法可將其分為兩種生物群及14種血清型。雖然許多研究報(bào)道了Uu各血清型與各種疾病之間的關(guān)系，但至今關(guān)于Uu的致病性研究尚未達(dá)成一致看法。近年來(lái)隨著其臨床分離率呈上升趨勢(shì)，人們對(duì)它的關(guān)注越來(lái)越多。相關(guān)研究顯示Uu在世界各地的流行差異顯著。為了構(gòu)建適合深圳地區(qū)的Uu基因分

2、型方法，找出無(wú)癥狀、藥物敏感人群與有癥狀多重耐藥人群Uu基因型的差異，弄清Uu基因型與多重耐藥性的關(guān)系，為研制更好的Uu診斷試劑提供明確的中國(guó)人基因背景。 【方法】 (1)收集深圳市第二人民醫(yī)院2006年1月至2006年4月在門診就診的病人標(biāo)本，選取有自覺(jué)癥狀的病人作病例組，選取同期體檢的無(wú)癥狀的人群作對(duì)照組； (2)將標(biāo)本直接接種于Uu液體選擇性培養(yǎng)基(培養(yǎng)鑒定＋藥敏)進(jìn)行初篩試驗(yàn)，對(duì)Uu陽(yáng)性的標(biāo)本作傳代培養(yǎng)，

3、留取標(biāo)本待測(cè)，并記錄藥敏結(jié)果； (3)將證實(shí)陽(yáng)性的標(biāo)本提取裂解產(chǎn)物制備DNA模板； (4)解脲脲原體基因型引物設(shè)計(jì)并合成； (5)基因擴(kuò)增分群與分型； (5)應(yīng)用AB1377測(cè)序儀對(duì)隨機(jī)抽取的陽(yáng)性的PCR產(chǎn)物進(jìn)行雙向DNA測(cè)序； (6)采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 【結(jié)果】 (1)檢測(cè)結(jié)果：病例組1002例液體分離培養(yǎng)，共篩檢出陽(yáng)性395例；用熒光定量PCR法做確

4、證試驗(yàn)，檢出陽(yáng)性393例，有2例未檢出，陽(yáng)性率為39.2％。對(duì)照組403例，液體培養(yǎng)陽(yáng)性121例，熒光定量PCR法檢測(cè)陽(yáng)性121例，陽(yáng)性率30.0％。 (2)解脲脲原體分群情況：病例組中313例解脲脲原體檢出生物一群251例(男90例，女161例)、生物二群44例(男12例，女32例)、兩群混合感染18例(男8例，女10例)；對(duì)照組中71例檢出生物一群58例(男20例，女38例)、生物二群11例(男1例，女10例)。兩組人群均以

5、生物一群感染為主。男女群的總感染率差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 (3)兩組人群生物一群的單型別分型情況：病例組分別檢出1、3、6、14型是32例(27.4％)、46例(39.3％)、28例(23.9％)、11例(9.4％)：檢出對(duì)照組1型20例(66.7％)、3型8例(26.7％)、6型2例(6.6％)、14型0例(0)。對(duì)照組生物一群1型單型別感染較病例組高，其它各組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 (4)根據(jù)液體培養(yǎng)的藥敏結(jié)果，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析

6、可知：紅霉素的耐藥率52.1％，阿奇霉素的耐藥率40.0％，四環(huán)素的耐藥率25.0％，氧氟沙星的耐藥率30.3％，環(huán)丙沙星耐藥率11.9％，交沙霉素和強(qiáng)力霉素的耐藥率較低，分別為11.0％，10.O％。另外，原始霉素和克拉霉素幾乎100％敏感。正常人群的藥物敏感的解脲脲原體基因型：生物一群的1、3、6單純型。有癥狀多重耐藥人群Uu基因型：生物二群與生物一群中各基因型的合并感染。該結(jié)果為指導(dǎo)臨床用藥提供基因背景，為改進(jìn)治療方案提供科學(xué)依據(jù)

7、。 【結(jié)論】 (1)深圳市病人解脲脲原體的陽(yáng)性檢出率為39.2％，高于正常人群，處于全國(guó)中間水平。 (2)深圳市解脲脲原體以生物一群感染常見(jiàn)，以單型別感染為主，混合感染的比例較低。其中女性組的陽(yáng)性率和男性組陽(yáng)性率之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 (3)病例組解脲脲原體的各型單純感染均明顯高于對(duì)照組，混合感染無(wú)差別。 (4)本研究的基因分型方法簡(jiǎn)單快捷，可用于批量檢測(cè)。 (5)對(duì)抗生素的濫用導(dǎo)致解脲脲