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![雙酚A遺傳毒性研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/07a443e3-06c4-4b76-adda-d489c4323bfd/07a443e3-06c4-4b76-adda-d489c4323bfd1.gif)
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文檔簡介
1、目的:雙酚A(bisphenol A, BPA),是一種廣泛使用的化工原料,添加BPA可使塑料制品具有輕巧耐用、無色透明以及加強抗沖擊性等特點,并有效防止水果和蔬菜從內部侵蝕金屬容器,所以BPA成為制造聚碳酸酯、環(huán)氧樹脂、食品包裝、牙科填充劑、食品罐頭涂料和醫(yī)療器械等產(chǎn)品的重要原料。BPA具有毒作用劑量小、潛伏時間長等特點,對健康造成多種潛在危害,國內外許多學者對BPA的毒性作用進行了研究報道。目前對BPA的毒性研究多集中在內分泌系統(tǒng)、
2、生殖系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等方面,其遺傳毒性還有待進一步研究。本實驗通過體外染毒檢測BPA對中國倉鼠卵巢細胞(CHO細胞)的細胞存活率、DNA的直接損傷作用、微核率以及染色體畸變率,并通過Ames試驗檢測BPA的致突變性,通過將上述檢測不同遺傳學終點的試驗相結合探討B(tài)PA的遺傳毒性。
方法:(1)以倉鼠卵巢細胞(CHO細胞)作為實驗系統(tǒng),選用四甲基偶氮唑鹽法(即MTT比色法)檢測不同濃度雙酚A對CHO細胞作用不同時間后,對細胞存活率的
3、影響;(2)采用單細胞凝膠電泳試驗(即SCGE彗星試驗),了解不同濃度及不同作用時間下雙酚A對CHO細胞DNA單鏈斷裂的損傷程度;(3)采用微核試驗研究不同濃度雙酚A對CHO細胞微核率的影響;(4)采用染色體畸變分析檢測不同濃度雙酚A對CHO細胞染色體畸變率及誘導的主要畸變類型;(5)通過Ames試驗了解不同濃度雙酚A的致突變效應。
結果:(1)MTT試驗結果顯示,分別經(jīng)12h及24h染毒處理后,當雙酚A終濃度為40μmol/
4、L時,CHO細胞的存活率顯著高于陰性對照組。當濃度高于80μmol/L時,細胞存活率呈現(xiàn)下降趨勢,各染毒組吸光度值與陰性對照組相比均具有統(tǒng)計學差異。(2)單細胞凝膠電泳實驗結果顯示,經(jīng)12h及24h處理后,雙酚A濃度高于80μmol/L時,可引起CHO細胞的拖尾率、尾部DNA百分含量及尾長增加。(3)微核試驗和染色體畸變試驗表明,在雙酚A處理24h后,當濃度高于100μmol/L時, CHO細胞的微核率和染色體畸變率顯著增加。其中染色體
5、畸變的類型以斷裂、無著絲粒斷片和裂隙為主。(4)Ames試驗檢測的BPA染毒濃度為10μg/皿~5mg/皿共九個劑量組,其結果為陰性。在活化和非活化條件下,與陰性對照組比較,可見部分菌株的回變菌落數(shù)有所增加,但并無統(tǒng)計學差異。
結論:(1)外培養(yǎng)條件下,雙酚A在染毒濃度為40μmol/L作用12h后,可顯著刺激細胞的生長,表現(xiàn)出一定的刺激效應。從80μmol/L開始,染毒12h對CHO細胞的增殖有明顯的抑制作用,表現(xiàn)出細胞毒性
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