不同方式的非血管化結(jié)構(gòu)性骨移植對(duì)骨缺損修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:研究非血管化結(jié)構(gòu)性骨移植,在骨缺損靶區(qū)域與骨小梁或骨應(yīng)力不同方向的植骨方式,對(duì)骨愈合微環(huán)境的影響,分析其可能存在的原理及機(jī)制。通過對(duì)植骨后骨缺損靶區(qū)域微環(huán)境的指標(biāo)測(cè)定,從影像學(xué)及微觀結(jié)構(gòu)對(duì)骨缺損不同植骨方式的修復(fù)重建作進(jìn)一步深入研究。為臨床治療骨缺損這一難題開拓新思路、提供新方法。
  方法:本實(shí)驗(yàn)首先建立骨缺損模型,選同產(chǎn)地、4-6個(gè)月、體重2.5-3.5kg的新西蘭大白兔38只,雌雄不限,在一側(cè)股骨中段截骨15mm(包括

2、骨膜),骨斷端用骨蠟封閉髓腔,微型鋼板固定股骨,維持骨斷端15mm間距,于12周后經(jīng)X線確定骨缺損情況。
  選取已制成骨缺損模型的新西蘭大白兔38只(保留2只),隨機(jī)均分A、B、C、三組,每組12只。以3%戊巴比妥鈉經(jīng)耳緣靜脈注射進(jìn)行麻醉,取同一側(cè)自體髂骨作植骨來源,并將所取髂骨沿骨小梁或應(yīng)力方向剪成大小相等8塊。先取出制作股骨缺損模型的鋼板螺釘,清理骨缺損處纖維組織、硬化骨,復(fù)通髓腔,復(fù)位,對(duì)線良好,微型鋼板、螺釘內(nèi)固定。A組

3、按照髂骨塊應(yīng)力(骨小梁)方向平行股骨縱軸方向植于股骨缺損區(qū);B組按照髂骨塊應(yīng)力(骨小梁)方向垂直股骨縱軸方向植于股骨缺損區(qū);C組將髂骨塊隨機(jī)植于股骨缺損區(qū)。術(shù)后自制夾板固定2周。分別于2、4、8周三個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè),每個(gè)時(shí)間點(diǎn)每組隨機(jī)抽取4只大白兔,檢測(cè)指標(biāo)為:1、觀察動(dòng)物的一般情況,包括術(shù)后觀察體溫、活動(dòng)、精神、胃納、傷口愈合情況。2、對(duì)實(shí)驗(yàn)側(cè)股骨行X-Ray檢查,大體觀察了解骨缺損修復(fù)情況及骨痂生長(zhǎng)情況,應(yīng)用計(jì)算機(jī)圖像分析處理軟件測(cè)

4、出植骨區(qū)平均光密度值,三組對(duì)照,計(jì)算光密度指數(shù)。3、空氣栓塞法處死動(dòng)物,迅速將所取標(biāo)本置固定液保存、脫鈣、脫水、蠟塊包埋等處理,制作切片,厚4um,HE染色、CD34染色,用免疫組織化學(xué)方法對(duì)植骨區(qū)的陽(yáng)性細(xì)胞占測(cè)量窗的面積(%)和新生骨生成量進(jìn)行記錄。第4、8周同法處理。
  結(jié)果:
  1.骨缺損模型的可靠性
  骨缺損模型制作12周后,X線檢查顯示:骨缺損區(qū)域無(wú)骨性連接,髓腔閉塞,斷端硬化,兩側(cè)斷端出現(xiàn)少量骨痂。大

5、體標(biāo)本:有少量比較薄的骨痂,骨缺損區(qū)為纖維瘢痕組織填充,缺損范圍為:13-14mm,符合骨標(biāo)準(zhǔn)缺損(criticalsizedefect,CSD)要求。
  2.一般情況觀察
  三組實(shí)驗(yàn)兔,1只因麻醉死亡,1只可能手術(shù)創(chuàng)傷過大第二日死亡,將備留的2只實(shí)驗(yàn)兔替代進(jìn)入實(shí)驗(yàn)步驟。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期內(nèi),所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物都進(jìn)行結(jié)果分析,動(dòng)物生長(zhǎng)良好,麻醉全醒后自由活動(dòng),切口均無(wú)紅腫、滲出,不需拆線。各組實(shí)驗(yàn)兔至處死前籠內(nèi)活動(dòng)正常,移植骨無(wú)移位

6、,鋼板螺釘無(wú)松動(dòng)、斷裂,未出現(xiàn)繼發(fā)骨折。
  3.大體標(biāo)本觀察
  術(shù)后不同時(shí)期未見骨缺損區(qū)域周圍軟組織變性、壞死,表面有纖維結(jié)締組織。后期缺損區(qū)骨痂增粗、增大,皮質(zhì)骨連續(xù)。
  4.X線觀察結(jié)果
  2周時(shí),移植骨均有變小,三組骨缺損區(qū)域界線清楚。A組,有少量斑片狀陰影;B組,骨缺損區(qū)域無(wú)明顯骨痂形成;C組,可見骨缺損區(qū)域有少量云霧狀陰影形成。
  4周時(shí):A組,骨缺損區(qū)域界線模糊,有大量骨痂形成;B組,

7、骨缺損區(qū)域有骨痂形成,移植骨界線清楚;C組,骨缺損區(qū)域模糊不清,較B組骨痂生長(zhǎng)明顯。
  8周:A、B、C三組骨缺損區(qū)域移植物界線模糊,大量骨痂形成,骨皮質(zhì)形成、連續(xù),髓腔未完全相通。
  各組骨缺損區(qū)光密度指數(shù)隨時(shí)間呈增加趨勢(shì),第4周時(shí),A組與B組比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);C組與B組比較,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);A組與C組比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。第2、8周時(shí),各組骨缺損區(qū)光密度指數(shù)比較,P>0.

8、05,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
  5.標(biāo)本病理結(jié)果
  5.1.免疫組化陽(yáng)性細(xì)胞占測(cè)量窗的面積(%)術(shù)后2周:各組骨缺損區(qū)域血管明顯增生,A組>C組>B組,PA-B<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;PC-B<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;PA-C<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。術(shù)后4周:PA-B<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;PC-B>0.05,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;PA-C>0.05,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。術(shù)后8周:A、B、C三組間陽(yáng)性細(xì)胞占測(cè)量窗的面積(%)接近(P>0

9、.05),無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
  5.2組織切片新生骨生成量術(shù)后2周:各組骨缺損區(qū)有不同程度的新骨生成,A、B、C三組間比較P<0.05,有統(tǒng)計(jì)意義;術(shù)后4周:各組骨缺損區(qū)新生骨生成量較兩周時(shí)明顯增多,PA-B<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;PC-B<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;PA-C>0.05無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。術(shù)后8周:A、B、C三組間比較P>0.05,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
  結(jié)論:非血管化結(jié)構(gòu)性骨移植在治療骨缺損時(shí),按骨小梁或應(yīng)力方向不

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