1、本試驗以龍血樹幼嫩莖段為材料，通過對龍血樹幼嫩莖段兩步培養(yǎng)法再生的研究，建立了龍血樹幼嫩莖段離體再生體系，證明了愈傷組織的發(fā)生和激素種類與濃度的關系；并在此基礎上研究了愈傷組織再生對不同人工誘變方法(60Co輻射、EMS、秋水仙素)的反應、被處理愈傷組織再生能力和再生植株性狀多樣性、以及再生植株不同生理角度(外觀性狀、細胞學)的變異性，得到了2株變異株系。并從龍血樹商業(yè)種植苗圃里選擇出11種變異類型。 (1)首次對海南龍血樹進行

2、了種質創(chuàng)新途徑的研究，田間自然變異的選擇是目前最為有效的途徑，組織培養(yǎng)分別培結合EMS、60Co輻射和秋水仙的誘變途徑也是有效果的。田間實生群體自然變異可高達20％，已發(fā)現(xiàn)有11中種變異類型，其中LXZ09類型的變異率高達8％。EMS誘變途徑中，濃度為2.0％的獲得最高的微核率(15.6‰)，EMS濃度為2.0％處理時間為4h的組合使材料達到半致死；細胞學的觀察看到了單微核、雙微核、三微核、染色體橋、滯留染色體和合胞體等染色體畸變現(xiàn)象，

3、再生苗中發(fā)現(xiàn)了1棵變異株。60Co輻射的誘變途徑中，20Gy的劑量使不定芽半致死，再生苗中發(fā)現(xiàn)了1棵變異株。秋水仙素誘導多倍體途徑中秋水仙素濃度0.5％，處理時間5d的處理組合能獲得較高的多倍率，多倍率為25％。 (2)首次獲得了海南龍血樹新種質13份，并較為系統(tǒng)地對11份自然變異的種質進行了植物學性狀觀察，其中6份材料具有成為龍血樹新品種的潛力。這11份資源中，LXS01、LXS02、LXS03、LXS04、LXS06、LXS

4、07這幾份材料具有成為龍血樹新品種的潛力。 (3)首次鑒定了海南龍血樹的染色體數(shù)目，構建了海南龍血樹根尖體細胞染色體制片技術。其技術要點是于上午9時～10時采集根尖，用飽和的對二氯苯預處理6h，固定4～18h，置于1mol/L稀鹽酸在60℃恒溫水浴酸化6min，置載玻片切片后用改良石炭酸品紅染色30min，敲片后顯微觀察。鑒定了海南龍血樹染色體數(shù)目(2n=42)。 (4)初步構建了基于組織培養(yǎng)的海南龍血樹誘變復合技術體系

5、。再生體系技術要點是愈傷組織的誘導培養(yǎng)基為MS+6-BA6.0mg/L+NAA0.5mg/L，誘導率可達62％;增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L，經4周培養(yǎng)，愈傷組織增殖率可達9.6；分化培養(yǎng)基為MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.1mg/L；生根培養(yǎng)基是MS+NAA0.3mg/L+AC1g/L，生根率為100％。再生體系結合EMS復合技術體系的要點是濃度為2.0％的EMS處理生長旺盛的愈傷組織時間為4