1、家蠶濃核病毒中國株(BmDNV-3)是我國蠶業(yè)上危害較大的病毒之一，是夏秋季養(yǎng)蠶中的常見病。家蠶中有部分品系對此病毒表現出完全抵抗，經典遺傳學分析發(fā)現，家蠶對BmDNV-3的抗性產生是由隱性單基因控制的。但其抗性產生的機制目前尚不清楚。本研究運用蛋白質組學的方法研究了濃核病毒感染后家蠶中腸的蛋白表達譜；用差異蛋白質組學的研究方法，比較了不同感受性家蠶品種在病毒感染后的24h、36h和48h中腸組織的差異蛋白；并分析了相關蛋白的基因結構。

2、其結果如下： 1.通過雙向電泳技術對感染BmDNV-3后家蠶的中腸組織的總蛋白進行了分離，利用基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜儀(MAIDI-TOF/TOF MS、)對表達量較高的蛋白點進行了肽質量指紋圖譜分析，并對肽質量指紋圖譜進行了數據庫比對分析。其結果是：家蠶中腸蛋白質經過雙向凝膠電泳和銀染后可以檢測出280個以上的蛋白點。對其中104個分離的較好的蛋白點進行了MALDI-TOF MS鑒定，這些蛋白點均得到了較強的肽質量指

3、紋信號峰，其中34個蛋白點得到了成功鑒定，包括大量的離子轉運蛋白與熱休克蛋白等。 2.從不同感受性家蠶品種在病毒感染后各時間段的中腸組織的差異蛋白中獲得了部分抗性相關蛋白?？偟膩碚f，不同時段得到的差異蛋白雖略有不同，但有一些蛋白在各個時段差異表現比較穩(wěn)定，這些蛋白是值得重視和研究的蛋白。例如，糖基轉移酶在各個時段的抗性品系中的表達量均高于感性品系。該酶是一種細胞膜表面蛋白，與細胞表面蛋白的糖基化有關。這一蛋白表達的差異可能意味著

4、細胞表面蛋白糖基化發(fā)生了改變。這與日本學者發(fā)現的抗BmDNV-2品系細胞表面蛋白糖基化位點改變，導致宿主對病毒的敏感性發(fā)生改變的結果一致。但由于蛋白質的糖基化需要多種糖基化酶的協(xié)同作用，此酶可能是蛋白糖基化調控網絡中的一個節(jié)點蛋白。研究中還發(fā)現一些在應激和機體處于高耗能狀態(tài)時表達升高的蛋白在抗性品系中有較高的表達。這說明，與感性品系相比，抗性品系對于病毒的入侵產生了更強的應激反應，這種增強的應激反應可能在抵抗病毒入侵時起到了一定的防御作

5、用。 3.本實驗中發(fā)現抗性品系中腸組織中有BmDNV-3 VD1-orf 1基因產物，這一病毒非結構蛋白的發(fā)現意味著該病毒確實可以在抗性品系中腸細胞中復制。 4.糖基轉移酶的基因分析通過電子克隆對家蠶糖基轉移酶基因進行了拼接，并運用并運用生物信息學技術對家蠶糖基轉移酶基因進行了初步分析，獲得了其保守結構域及與其它物種的進化關系。進化樹分析表明，通過電子克隆得到的家蠶糖基轉移酶蛋白與其它昆蟲的糖基轉移酶蛋白進化關系較近，而