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![西洋參種子休眠解除與萌發(fā)分子機理研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/8/cac8fd28-b266-42fe-87a6-97dd505b03d1/cac8fd28-b266-42fe-87a6-97dd505b03d11.gif)
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文檔簡介
1、西洋參為多年生草本植物,具有廣泛的藥理活性和藥用價值。西洋參主要通過種子繁殖,但種子具有深度休眠的特性,需要溫度層積解除休眠。目前西洋參種子休眠與萌發(fā)的分子機制尚不明確。
赤霉素和脫落酸是調(diào)控種子休眠與萌發(fā)的關(guān)鍵激素。為研究其作用規(guī)律,本研究采用6種生長調(diào)節(jié)劑(赤霉素GA3、赤霉素GA4+7、脫落酸、氟啶酮、多效唑、烯效唑)處理西洋參種子。陰干種子進行高溫20℃層積、裂口種子低溫4℃層積,每隔30d取樣計算胚率;在形態(tài)休眠初期
2、、中期、解除期、生理休眠初期、中期、解除期分別取樣,用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測其內(nèi)源激素GA和ABA含量。研究發(fā)現(xiàn)GA3、GA4+7可以縮短生理后熟時間,且處理后生理休眠期內(nèi)源ABA含量低于對照組。
通過分析轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),對125個與植物激素代謝和休眠解除與萌發(fā)相關(guān)的基因進行半定量PCR,其中23個基因表現(xiàn)出良好的特異性,在種子層積初期(0d)表達量較低或不表達。篩選出與激素和休眠解除相關(guān)基因10個(NCED、ZEP、DEL
3、LA、GIGANTE、GA2ox、GA20ox、GA3ox、KAO、CYP707A、DRM)進行熒光定量PCR。研究發(fā)現(xiàn)GA合成關(guān)鍵基因GA20ox、GA3ox、KAO在生理后熟期的表達高于形態(tài)后熟期,GA3、GA4+7處理后GA合成基因表達量低于對照組。
對西洋參種子中GA分解代謝基因PqGA2ox和GA合成關(guān)鍵基因PqGA20ox進行克隆與序列分析,獲得GenBank登陸錄號KJ802836和KJ740524,生物信息學(xué)分
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