鷹嘴豆糖醇的分離純化、腸道微生態(tài)調節(jié)、抗腫瘤和免疫調節(jié)功能研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、鷹嘴豆糖醇是一種存在于鷹嘴豆中的低聚三糖,是肌醇的C6位以α-(1→6)糖苷鍵結合2分子半乳糖而形成的,2個半乳糖的之間也是通過α-(1→6)糖苷鍵進行連接。鷹嘴豆糖醇的來源是鷹嘴豆,鷹嘴豆中有10%左右的碳水化合物為鷹嘴豆糖醇。本研究目的在于從鷹嘴豆中提取鷹嘴豆糖醇(純度>95%),并且對鷹嘴豆糖醇的調節(jié)腸道微生態(tài)、抗腫瘤及免疫調節(jié)功能進行評價,結果如下:
  1、鷹嘴豆糖醇的分離純化
  首先,把鷹嘴豆糖醇中的可溶性糖通

2、過重量比為1∶1的活性炭-硅藻土中壓柱分離,通過高效液相色譜分析鷹嘴豆中可溶性糖組成。結果表明,鷹嘴豆中主要含有果糖、蔗糖、棉籽糖、鷹嘴豆糖醇及水蘇糖。最終得到純度為95.17%的鷹嘴豆糖醇。
  2、鷹嘴豆糖醇調節(jié)腸道微生態(tài)能力的研究
  采用體外厭氧糞樣混合培養(yǎng)的方式對鷹嘴豆糖醇進行發(fā)酵培養(yǎng),測定鷹嘴豆糖醇對腸道內菌群組成的影響??瞻讓φ战M是不添加任何碳源的培養(yǎng)基,陽性對照組為低聚果糖。使用FISH技術對不同培養(yǎng)時間的有

3、益菌群、有害菌群以及總菌群的數(shù)量變化進行測定。結果表明,鷹嘴豆糖醇對雙歧桿菌、乳酸菌都有較好的增殖作用,而對擬桿菌、梭狀菌的生長有一定的抑制作用,但是鷹嘴豆糖醇對總菌群的數(shù)量沒有顯著影響,說明鷹嘴豆糖醇的益生作用在于調節(jié)腸道內菌群組成,增加有益菌,抑制有害菌。此外通過HPLC技術對發(fā)酵過程中產(chǎn)生的各種SCFA含量的變化進行測定,厭氧發(fā)酵24 h后,鷹嘴豆糖醇在發(fā)酵過程中生成了一定量的甲酸、乳酸、乙酸、丙酸、丁酸,總短鏈脂肪酸的量較高,都

4、高于對照。
  3、鷹嘴豆糖醇抗腫瘤活性研究
  采用MTT法測定鷹嘴豆糖醇對HGC-27的抑制作用,培養(yǎng)時間為24h時,除了最高濃度樣品的抑制率在35%,其余各濃度樣品的抑制率均低于20%,這表明這幾種濃度的鷹嘴豆糖醇對細胞沒有毒性。培養(yǎng)時間為48h時,各濃度樣品的抑制率都明顯高于培養(yǎng)時間為24h時的抑制率;同樣,當培養(yǎng)時間為72h時,各濃度樣品的抑制率也明顯高于培養(yǎng)時間為48h時的抑制率,且最高抑制率達到82%。因此,表

5、明鷹嘴豆糖醇對胃癌細胞HGC-27有明顯抑制作用。
  4、鷹嘴豆糖醇免疫調節(jié)活性的研究
  通過體外細胞培養(yǎng)和小鼠免疫抑制模型試驗對鷹嘴豆糖醇的免疫調節(jié)功能進行綜合評價。
  采用腹腔注射Cy建立小鼠動物免疫抑制模型,結果顯示Cy對各項免疫指標均表現(xiàn)出不同程度的抑制作用,表明小鼠免疫抑制模型造模成功。通過環(huán)磷酰胺誘導的免疫抑制小鼠模型研究鷹嘴豆糖醇的體內免疫調節(jié)活性。結果顯示,鷹嘴豆糖醇能夠拮抗環(huán)磷酰胺引起的小鼠脾臟

6、萎縮,提高免疫抑制小鼠脾臟中的溶菌酶活性和血清中溶血素水平,還可以提高免疫抑制小鼠T淋巴細胞的免疫活性。這些結果表明,鷹嘴豆糖醇不僅能夠提高免疫抑制小鼠的非特異性免疫能力,還可以提高其特異性免疫能力。為鷹嘴豆的充分利用建立了較為堅實的基礎。
  使用腹腔巨噬細胞系RAW264.7研究鷹嘴豆糖醇的體外免疫調節(jié)能力。實驗結果表明:鷹嘴豆糖醇在一定濃度范圍能有效的促進RAW264.7細胞的增殖;鷹嘴豆糖醇能夠激活RAW264.7巨噬細胞

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