奶山羊乳腺上皮細(xì)胞系的建立.pdf_第1頁(yè)
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1、應(yīng)用動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥用蛋白是生物高新技術(shù)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。乳腺生物反應(yīng)器研究從模式動(dòng)物——小鼠的轉(zhuǎn)基因開(kāi)始,逐步建立起了大動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器制備的技術(shù)平臺(tái)。以牛羊等反芻動(dòng)物制備乳腺生物反應(yīng)器的前景十分誘人。奶牛產(chǎn)奶量高,一旦得到高表達(dá)的個(gè)體,其產(chǎn)量和效益十分可觀。但奶牛作為單胎動(dòng)物,生產(chǎn)周期長(zhǎng)、成本高。目前利用轉(zhuǎn)基因羊制備乳腺生物反應(yīng)器有一些成功的例子。奶山羊泌乳期長(zhǎng),單位產(chǎn)奶量高,相對(duì)成本低,在乳腺生物反應(yīng)器的制備方面極具應(yīng)用價(jià)

2、值,以此為基礎(chǔ)將推動(dòng)奶牛泌乳與乳腺生物反應(yīng)器研究的不斷深入。 體外培養(yǎng)的奶山羊乳腺上皮細(xì)胞在乳腺生長(zhǎng)發(fā)育和泌乳機(jī)制的研究及乳腺生物反應(yīng)器的應(yīng)用等方面具有重要作用。目前建立的一些奶山羊乳腺上皮細(xì)胞系往往喪失了泌乳功能,不適合作為研究泌乳機(jī)制及檢測(cè)乳腺表達(dá)載體的細(xì)胞模型。因此有必要對(duì)奶山羊乳腺上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)、激素與乳腺上皮細(xì)胞分泌功能的關(guān)系等方面進(jìn)行深入研究,以探索建立奶山羊乳腺生物反應(yīng)器細(xì)胞模型的有效方法。 本研究選用

3、泌乳性能好的關(guān)中奶山羊作為實(shí)驗(yàn)材料。利用酶消化法獲得了奶山羊乳腺上皮細(xì)胞,對(duì)純化的乳腺上皮細(xì)胞進(jìn)行了鑒定。通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)體系的確立及生物學(xué)形狀的檢測(cè)建立并鑒定了奶山羊乳腺上皮細(xì)胞系。此外,SDS-PAGE、甘油三酯生化測(cè)定及HPLC法對(duì)乳蛋白、乳脂和乳糖的測(cè)定反映了激素對(duì)乳腺上皮細(xì)胞泌乳功能的影響。從而為奶山羊乳腺生物反應(yīng)器細(xì)胞模型的建立及奶山羊乳腺發(fā)育和泌乳機(jī)制的研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,本研究獲得了純化的奶山羊乳腺上皮

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