1、目的：LKB1是關(guān)鍵抑癌因子，其編碼基因的缺陷可導(dǎo)致LKB1蛋白的表達(dá)或者活性缺失，這與錯構(gòu)瘤性息肉的發(fā)生及多種器官癌變密切相關(guān)。重建LKB1的表達(dá)則可對腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生生長抑制效應(yīng)。探討LKB1在細(xì)胞中的定位對研究其功能有重要作用。因此，本研究在人肺腺癌細(xì)胞A549中表達(dá)具有EGFP熒光標(biāo)簽的重組LKB1，并探討重建LKB1表達(dá)對于A549細(xì)胞的生長抑制效應(yīng)。
　　 方法：應(yīng)用PCR方法擴(kuò)增LKB1蛋白編碼基因全長cDNA序列，并

2、利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù)將重組質(zhì)粒pEGFP-N1-LKB1和pEGFP-N1質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞。分別在轉(zhuǎn)染12h，24h，36h，48h，60h，72h時，用MTT法檢測LKB1對A549細(xì)胞的影響；并用Western blot檢測LKB1和p53在A549細(xì)胞中的表達(dá)量變化。
　　 結(jié)果：成功構(gòu)建pEGFP-N1-LKB1重組質(zhì)粒并轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞。在轉(zhuǎn)染pEGFP-N1-LKB1和pEGFP-N1的A549細(xì)胞中觀察到綠色