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![農(nóng)桿菌介導(dǎo)的安祖花遺傳轉(zhuǎn)化研究.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/8/73e99746-02c2-4165-9063-00e48f6a0675/73e99746-02c2-4165-9063-00e48f6a06751.gif)
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1、安祖花(Anthurium andreanum Lind.)作為世界第二大熱帶花卉,因其獨(dú)特的觀賞魅力倍受人們的青睞,但僅有的品種已不能滿足人們的需求。因此,許多研究者通過基因改造手段,對(duì)其進(jìn)行花色改變,以提高商品價(jià)值。 本研究的主要目標(biāo)是通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化方法導(dǎo)入類胡蘿卜素合成酶基因LyeB,使得葉片中積累大量的類胡蘿卜素,從而改變了安祖花的花色。本研究的主要研究結(jié)果如下: (1)優(yōu)化了安祖花的組織培養(yǎng)體系。首先
2、,對(duì)比了液體培養(yǎng)和固體培養(yǎng)這兩種培養(yǎng)方式對(duì)安祖花愈傷組織誘導(dǎo)率的影響。結(jié)果表明,液體培養(yǎng)要明顯優(yōu)于固體培養(yǎng),并且液體培養(yǎng)基誘導(dǎo)的愈傷組織誘導(dǎo)率大約是固體培養(yǎng)的3~4倍。其次,通過正交實(shí)驗(yàn),分析NAA、活性碳、水解乳蛋白、香蕉泥四個(gè)因素對(duì)安祖花生根壯苗的影響,并得到最佳培養(yǎng)方案。當(dāng)培養(yǎng)基中含NAA0.05mg/L、香蕉泥100g/L時(shí),T×P生根良好,而ARZ在NAA0.05mg/L、水解乳蛋白400 g/L的培養(yǎng)基中生根最佳。
3、(2)建立了根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的安祖花遺傳轉(zhuǎn)化體系。以愈傷組織為轉(zhuǎn)化受體,詳細(xì)地探討了農(nóng)桿菌濃度,浸染時(shí)間、共培養(yǎng)時(shí)間、AS濃度、超聲波處理對(duì)T-DNA轉(zhuǎn)化的影響,并優(yōu)化了轉(zhuǎn)化條件。結(jié)果表明,農(nóng)桿菌濃度、浸染時(shí)間、共培養(yǎng)時(shí)間、AS濃度、超聲波處理都對(duì)農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化有一定的影響,它們?cè)谝欢ǚ秶鷥?nèi)與抗性愈傷率呈正比,這些因素過高和過低都不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化;將愈傷組織在OD600=0.6的菌液中浸染15min,然后超聲波處理20s,再在黑暗
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