1、對(duì)于現(xiàn)代化養(yǎng)雞業(yè)來說，疾病防治是成功的關(guān)鍵所在，而疾病的預(yù)防又需要我們了解雞自身的免疫狀態(tài)和機(jī)制。研究免疫器官的發(fā)育和免疫功能的發(fā)生，可以使我們了解到雞不同時(shí)期的免疫狀態(tài)和免疫機(jī)制，為適時(shí)免疫提供參考依據(jù)，從而達(dá)到疾病防治的目的。 本實(shí)驗(yàn)分別選擇了13、15、18、20日齡雞胚及1、7、21、35日齡雛雞，每個(gè)時(shí)期取5只雞的法氏囊，制作冰凍切片，分別進(jìn)行HE染色和免疫組化染色；同時(shí)在胚胎20日齡以后的各時(shí)期另取5只雞胚或雛雞的法

2、氏囊，分離淋巴細(xì)胞，進(jìn)行淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。 本研究觀察了從雞胚到出殼后的不同生長(zhǎng)發(fā)育階段法氏囊的組織結(jié)構(gòu)，結(jié)果表明：胚胎13日齡時(shí)，法氏囊開始發(fā)育，粘膜上皮下形成結(jié)節(jié)狀細(xì)胞集團(tuán)；胚胎15日齡，聚集的細(xì)胞集團(tuán)形成初始的淋巴濾泡；胚胎18日齡到出殼后1日齡，濾泡內(nèi)淋巴細(xì)胞數(shù)量增多，多數(shù)濾泡髓質(zhì)和皮質(zhì)界限仍不明顯；7日齡雛雞法氏囊髓質(zhì)皮質(zhì)分界清晰，濾泡數(shù)量顯著增多；21日齡到35日齡，濾泡由多邊形逐漸轉(zhuǎn)變成長(zhǎng)方形；在35日齡時(shí)，粘膜上

3、皮細(xì)胞逐漸增多，排列緊密，細(xì)胞核緊密排列成直線位于基底部。從而得出，直至出殼前雞胚法氏囊尚未形成較完整的，能組織起有效體液免疫促進(jìn)作用的組織基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)，其完善的形態(tài)結(jié)構(gòu)需在后天環(huán)境中分化和發(fā)育。 利用免疫組織化學(xué)法研究了IgM、IgG和IgA三種B細(xì)胞在法氏囊內(nèi)的出現(xiàn)、組織定位及分布變化規(guī)律。結(jié)果顯示，IgM<'+>和IgG<'+>兩種B細(xì)胞都是最早出現(xiàn)在胚胎13日齡，分別在粘膜上皮內(nèi)首先檢測(cè)到；胚胎15日齡，IgM<'+>和Ig

4、G<'+>兩種B細(xì)胞數(shù)量均顯著增多(P<0.05)，且IgM<'+>細(xì)胞顯著多于IgG<'+>細(xì)胞，IgM<'+>和IgG<'+>細(xì)胞都聚集到粘膜上皮下形成陽性細(xì)胞集團(tuán)，外周包裹扁平上皮，形成淋巴濾泡；胚胎18日齡，在粘膜上皮內(nèi)初次檢測(cè)到IgA<'+>B細(xì)胞，說明法氏囊內(nèi)IgA<'+>B細(xì)胞出現(xiàn)最晚，此時(shí)濾泡內(nèi)細(xì)胞更加密集，IgM<'+>和IgG<'+>兩種B細(xì)胞繼續(xù)增加，IgG<'+>細(xì)胞數(shù)量增加更為明顯，IgG<'+>細(xì)胞明顯比Ig

5、M<'+>細(xì)胞多；胚胎20日齡至出殼后1日齡，IgM<'+>、IgG<'+>、IgA<'+>三種B細(xì)胞數(shù)量增加不顯著，IgG<'+>細(xì)胞數(shù)量明顯多于其他兩種陽性細(xì)胞，個(gè)別濾泡髓質(zhì)和皮質(zhì)初始形態(tài)可確定，單個(gè)淋巴濾泡的平均面積無明顯變化；7日齡IgG<'+>細(xì)胞數(shù)量仍然比IgM<'+>細(xì)胞多，IgA<'+>細(xì)胞數(shù)量驟然增加，此時(shí)陽性細(xì)胞多分布于濾泡髓質(zhì)內(nèi)，濾泡間小梁周圍也分布少數(shù)IgA<'+>細(xì)胞，單個(gè)淋巴濾泡平均面積顯著增加(P<0.05

6、)；21日齡時(shí)，IgM<'+>、IgG<'+>和IgA<'+>三種細(xì)胞數(shù)量繼續(xù)不斷增加，IgG<'+>細(xì)胞數(shù)量達(dá)到峰值，其數(shù)量顯著高于IgM<'+>和IgA<'+>細(xì)胞；35日齡時(shí)，IgM<'+>和IgA<'+>細(xì)胞數(shù)量繼續(xù)增加，而IgG<'+>細(xì)胞數(shù)量稍有下降，但顯著高于同日齡其他兩種陽性細(xì)胞?？梢?，從胚胎20日齡直到出殼后35日齡，三種陽性細(xì)胞的整體變化趨勢(shì)是不斷增加的，隨著日齡的不斷增長(zhǎng)，淋巴濾泡的面積也逐漸增大。這些表明了胚胎期

7、和出殼早期雛雞的IgM<'+>、IgG<'+>和IgA<'+>B淋巴細(xì)胞是如何不斷分化發(fā)育的。 B細(xì)胞增殖反應(yīng)檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，出殼后4日齡以前，法氏囊內(nèi)B細(xì)胞對(duì)有絲分裂原PMA的刺激幾乎無增殖反應(yīng)；4日齡時(shí)，B細(xì)胞開始對(duì)PMA刺激發(fā)生增殖反應(yīng)，此時(shí)B細(xì)胞自身也開始增殖，到10日齡達(dá)到峰值；4日齡至21日齡，B細(xì)胞對(duì)PMA刺激指數(shù)持續(xù)增大。說明隨著日齡增長(zhǎng)，B細(xì)胞免疫功能逐漸增強(qiáng)。 本實(shí)驗(yàn)揭示了免疫器官法氏囊的組織結(jié)構(gòu)發(fā)育、B淋巴細(xì)