蘿卜及其近緣屬種親緣關(guān)系分析與遺傳圖譜構(gòu)建.pdf_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、蘿卜(Raphanus sativus L)是起源于中國(guó)的一種重要的蔬菜作物,種質(zhì)資源十分豐富。合理進(jìn)行親本選配進(jìn)行品種遺傳改良是當(dāng)前育種工作的重點(diǎn)。不同種屬間親緣關(guān)系的評(píng)價(jià)和遺傳圖譜的構(gòu)建研究對(duì)提高蘿卜育種效率和推動(dòng)蘿卜育種工作的發(fā)展具有重要意義。本研究首次利用RAMP標(biāo)記對(duì)蘿卜遺傳多樣性進(jìn)行研究,分析和探討蘿卜及蕓薹屬材料間親緣關(guān)系。應(yīng)用RAPD標(biāo)記技術(shù)對(duì)蘿卜親本、F<,1>及其F<,2>分離群體進(jìn)行遺傳分析;并以蘿卜亞種間的F<,

2、2>代群體為作圖群體,利用RAPD、ISSR、RAMP標(biāo)記初步構(gòu)建出國(guó)內(nèi)第一張?zhí)}卜遺傳圖譜。為蘿卜的分子育種和QTL定位奠定了基礎(chǔ)。 采用RAMP標(biāo)記分析了十字花科17個(gè)蘿卜品種及與11個(gè)蕓薹屬材料的遺傳多樣性與親緣關(guān)系。35組引物組合共產(chǎn)生626條RAMP條帶,多態(tài)性高達(dá)98.7%,平均每組引物可產(chǎn)生17.7條多態(tài)性條帶。利用NTSYS-pc軟件進(jìn)行聚類分析和主坐標(biāo)分析,兩者結(jié)果一致。研究結(jié)果還表明,蘿卜屬與蕓薹屬可獨(dú)立聚類,

3、但它們之間的遺傳相似水平較高;蘿卜種內(nèi)的RAMP多態(tài)性較豐富,有5個(gè)引物組合可以單獨(dú)將17份蘿1、材料各自分開,可以根據(jù)地理起源與根皮色基本劃分蘿卜品種;蕓薹屬內(nèi),聚類分析中,B染色體組與A、C染色體組物種相互分開,說明不同種之間的遺傳關(guān)系與它們的染色體組有很大的相關(guān)性,B染色體組與A、C染色體組物種的遺傳關(guān)系較遠(yuǎn);此外,蘿卜變種“藍(lán)花子”、“美泰黑森”與蕓薹屬的親緣關(guān)系相對(duì)于普通栽培種要近。研究結(jié)果也支持了蘿卜來源于rapa/oler

4、acea進(jìn)化途徑和nigra進(jìn)化途徑的雜種的假說。研究表明RAMP分子標(biāo)記是評(píng)價(jià)十字花科種屬間遺傳多樣性與親緣關(guān)系的一種有效方法。 從463條隨機(jī)引物中篩選出75條引物用于親本及F<,1>的RAPD標(biāo)記的遺傳動(dòng)態(tài)分析,多態(tài)性條帶的變化范圍為26.1%~31%,平均每個(gè)引物可產(chǎn)生1.95~2.37條,多態(tài)性水平較低。正反交F<,1>的擴(kuò)增位點(diǎn)也有差異,其中大部分都呈現(xiàn)出母性擴(kuò)增的規(guī)律,有31.1%差異位點(diǎn)表現(xiàn)出父性擴(kuò)增的規(guī)律,可能

5、是該位點(diǎn)在偏向于在表達(dá)障礙較小的雜交中表達(dá)。用24條隨機(jī)引物對(duì)28株F<,2>單株進(jìn)行分析,獲得34個(gè)RAPD標(biāo)記,其中有4個(gè)在F<,2>代未發(fā)生分離。卡方測(cè)驗(yàn)表明,25個(gè)標(biāo)記正常分離,占總數(shù)的73.5%,表明RAPD標(biāo)記在蘿卜F<,2>分離群體主要是呈正常孟德爾遺傳。說明RAPD標(biāo)記能用于本群體的遺傳作圖。 以Nau-WH-04(Raphanus sativus L.)×藍(lán)花子(R..sativus L.var raphani

6、stroid)得到的180株F<,2>代單株為作圖群體,利用形態(tài)學(xué)標(biāo)記和RAPD、ISSR、RAMP分子標(biāo)記構(gòu)建蘿卜亞種間的遺傳圖譜。172個(gè)標(biāo)記用于連鎖分析,得到一張包含78個(gè)標(biāo)記,13個(gè)連鎖群的遺傳圖譜框架,包括55個(gè)RAPD標(biāo)記、6個(gè)ISSR標(biāo)記、14個(gè)RAMP標(biāo)記和3個(gè)形態(tài)標(biāo)記,其中來自父本“藍(lán)花子”的標(biāo)記46個(gè),31個(gè)標(biāo)記來自母本“Nau-WH-04”。用于連鎖分析的172個(gè)標(biāo)記中除6個(gè)未發(fā)生分離外,還有94個(gè)標(biāo)記保持獨(dú)立而未

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