1、本研究分為三部分：
　　 實(shí)驗(yàn)一、Ouabain及其受體NKA-α1抗體、NKA-α4抗體對(duì)正常人精子運(yùn)動(dòng)功能的影響
　　 目的：研究Ouabain 及其受體NKA-α1抗體、NKA-α4抗體對(duì)正常人精子運(yùn)動(dòng)功能的影響。
　　 方法：按世界衛(wèi)生組織標(biāo)準(zhǔn)選取正常精液標(biāo)本60例，上游法進(jìn)行優(yōu)化，其中30例分別與不同濃度（1×10-2 M～1×10-7 M）Ouabain 共孵育，采用CASA系統(tǒng)檢測(cè)精子運(yùn)動(dòng)功能的變化

2、，觀察指標(biāo)為a+b 級(jí)精子百分率、精子活動(dòng)率、直線速度、鞭打頻率、直線性、前向性、擺動(dòng)性等；另外30例分別與NKA-α1 抗體和NKA-α4 抗體共孵育，CASA檢測(cè)精子運(yùn)動(dòng)功能的變化，觀察指標(biāo)同上。
　　 結(jié)果：1、Ouabain對(duì)精子活動(dòng)率和a+b 級(jí)精子百分率的影響呈現(xiàn)出一定的時(shí)效性，隨著時(shí)間的延長有逐漸降低的趨勢(shì)；較高劑量（1×10-2 M～1×10-5 M）Ouabain與優(yōu)化后的精子共孵育4h后，精子活動(dòng)率下降了62

3、.7%～68.4%，與陰性對(duì)照組相比差異有顯著性（p<0.05），a+b 級(jí)精子百分率下降了81.5%～85.7%，與陰性對(duì)照組相比差異有極顯著性（p<0.01），但兩參數(shù)4個(gè)劑量組間變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）；較低劑量（1×10-6 M和1×10-7 M）Ouabain與優(yōu)化后的精子共孵育后，精子活動(dòng)率及a+b 級(jí)精子百分率分別下降了27.2±3.7%和24.5±2.9%，與陰性對(duì)照組比較差異無顯著性（p>0.05）；其余精子運(yùn)

4、動(dòng)參數(shù)包括曲線速度、鞭打頻率、側(cè)擺幅度、平均位移角度均未見明顯變化。2、①加入Anti-α1和Anti-α4后的精子活動(dòng)率分別下降了28.1±2.8%和32.9±3.4%，與對(duì)照組相比差異均有極顯著性（p<0.01）；但Anti-α1和Anti-α4兩者間的差異無顯著性（p>0.05）；②加入Anti-α1和 Anti-α4后的a+b 精子百分率分別下降了38.7±3.8%和53.2±4.4%，與對(duì)照組相比差異均有極顯著性（p<0.01

5、）；與Anti-α1 相比，Anti-α4的作用更明顯（p<0.01）。③其它運(yùn)動(dòng)參數(shù)如曲線速度、鞭打頻率、側(cè)擺幅度、平均位移角度均未見顯著性變化。
　　 結(jié)論：Ouabain 及其受體NKA-α1、NKA-4 多克隆抗體能顯著減低體外培養(yǎng)正常人精子的運(yùn)動(dòng)能力，主要影響精子活動(dòng)率和a+b 級(jí)精子百分率即精子直線運(yùn)動(dòng)能力；與NKA-α1 抗體相比較，NKA-α4抗體對(duì)精子運(yùn)動(dòng)能力的影響作用更明顯，在精子運(yùn)動(dòng)能力的調(diào)控中發(fā)揮更為主要

6、的作用。
　　 實(shí)驗(yàn)二、正常男性及弱精子癥患者精漿中EO水平的比較性研究
　　 目的：檢測(cè)正常男性、輕度及重度弱精子癥患者精漿中EO含量，初步探討EO與弱精子癥及病程的相關(guān)性。
　　 方法：按世界衛(wèi)生組織標(biāo)準(zhǔn)選取60例正常精液標(biāo)本，另外選取60例輕度弱精子癥和60例重度弱精子癥精液標(biāo)本，采用自制的抗Ouabain 多克隆抗體，運(yùn)用競(jìng)爭(zhēng)性ELISA法檢測(cè)精漿中EO的水平。
　　 結(jié)果：輕度及重度弱精子癥患者

7、精漿中EO水平分別為25.27±1.71 μg/L和26.52±1.82 μg/L，明顯高于正常男性精漿水平19.32±1.45 μg/L，差異均具有極顯著性（p<0.01）；與輕度弱精子癥相比較，重度弱精子癥患者精漿中EO 水平呈繼續(xù)升高的趨勢(shì)，但差異無顯著性（p>0.05）。
　　 結(jié)論：EO在弱精子癥患者精漿中的水平明顯升高，且與疾病的病程可能呈現(xiàn)一定的正相關(guān)性，結(jié)合實(shí)驗(yàn)一結(jié)果表明，EO可能參與了精子運(yùn)動(dòng)能力的調(diào)控，EO/

8、NKA可能是弱精子癥病理調(diào)控的新途徑。
　　 實(shí)驗(yàn)三、EO在正常大鼠和弱精子癥大鼠睪丸中的表達(dá)
　　 目的：檢測(cè)EO在正常和弱精子癥SD大鼠睪丸中的表達(dá)和表達(dá)特征，探討EO和弱精子癥的相互調(diào)節(jié)關(guān)系。
　　 方法：選擇正常SD大鼠和弱精子癥SD大鼠各10只；制作睪丸石蠟切片，采用自制抗Ouabain 多克隆抗體，運(yùn)用免疫組織化學(xué)S-P法檢測(cè)EO在兩組大鼠睪丸中的表達(dá)。
　　 結(jié)果：EO表達(dá)于正常組、弱精子癥