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![同種異體脂肪干細(xì)胞組織工程骨修復(fù)管狀骨缺損.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/5f680061-2308-49bf-a113-1f2711403096/5f680061-2308-49bf-a113-1f27114030961.gif)
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文檔簡介
1、目的:脂肪干細(xì)胞(Adipose-Derived Stem Cell, ADSCs)因具有良好的成骨分化潛能而常被用來做為骨組織工程的種子細(xì)胞。本實驗在脂肪干細(xì)胞提取、培養(yǎng)及成骨誘導(dǎo)分化所做工作的基礎(chǔ)上,建立兔尺骨缺損模型,進(jìn)一步探討同種異體脂肪干細(xì)胞組織工程骨修復(fù)管狀骨缺損的可行性。
方法:(1)獲取新西蘭大白兔的肩胛部脂肪,分離培養(yǎng)具有多向分化潛能的脂肪干細(xì)胞;(2)以成骨誘導(dǎo)液培養(yǎng)的第3代細(xì)胞(P3)為實驗組,LG-DM
2、EM作為對照組。DNA定量法測定細(xì)胞的增殖曲線、定性檢測堿性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, ALP)及細(xì)胞外鈣鹽沉積情況;(3)P3兔ADSCs與脫鈣骨材料復(fù)合后,體外成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)(LG-DMEM設(shè)為對照)。用掃描電鏡對細(xì)胞-材料復(fù)合物的表面進(jìn)行觀察、DIO標(biāo)記細(xì)胞后采用激光共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況、定量檢測堿性磷酸酶及細(xì)胞外鈣離子;(4)制造兔兩側(cè)尺骨臨界大小(15mm長度)的缺損,分別植入兔ADSCs-脫鈣骨
3、復(fù)合物體(實驗組)和單純脫鈣骨材料(對照組);(5)12周后取樣本,行三維CT和組織學(xué)檢測,觀察成骨情況。
結(jié)果:兔ADSCs體外增殖能力強(qiáng),且具有多向分化潛能;與脫鈣骨材料具有良好的細(xì)胞相容性;細(xì)胞材料復(fù)合物植入12周后,三維CT顯示實驗組有新生骨基質(zhì)長成,對照組未見骨組織生成。組織學(xué)檢測顯示實驗組缺損處被典型的骨組織取代,可見新生骨小梁附著于脫鈣骨表面,而對照組中只有少量的骨組織和纖維組織充填。
結(jié)論:通過正確的
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