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![COX-2、CCR7的表達(dá)與胃癌轉(zhuǎn)移機(jī)制研究.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/dd24469b-78ed-464e-9d38-fa15ee1bc2eb/dd24469b-78ed-464e-9d38-fa15ee1bc2eb1.gif)
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文檔簡(jiǎn)介
1、第一章、COX-2、CCR7在胃癌中的表達(dá)
目的:探討COX-2、CCR7在胃癌中的表達(dá)與淋巴轉(zhuǎn)移的組織病理分化、浸潤(rùn)深度、淋巴轉(zhuǎn)移等臨床病理學(xué)參數(shù)的關(guān)系,并分析COX-2、CCR7表達(dá)的相關(guān)性。
方法:采用免疫組織化學(xué)方法對(duì)胃癌組織100例、胃癌癌旁組織40例石蠟包埋切片進(jìn)行染色,檢測(cè)COX-2、CCR7的表達(dá),分析其在胃癌組織的表達(dá)與臨床病理學(xué)參數(shù)的關(guān)系,對(duì)COX-2、CCR7的表達(dá)進(jìn)行相關(guān)性分析。
結(jié)
2、果:在胃癌組織,COX-2、CCR7均高表達(dá),表達(dá)率分別為72.5%和67.5%,二者表達(dá)有相關(guān)性(P<0.05)。COX-2、CCR7的表達(dá)均與腫瘤的浸潤(rùn)深度、TNM分期、淋巴轉(zhuǎn)移、腫瘤大小相關(guān)(P<0.05),與胃癌患者的診斷年齡、性別等因素?zé)o關(guān)(P>0.05)。CCR7的表達(dá)與腫瘤的病理分化、腫瘤部位相關(guān),但COX-2的表達(dá)與此無(wú)關(guān)。
結(jié)論:COX-2、CCR7在胃癌組織高表達(dá),二者表達(dá)有相關(guān)性。COX-2、CCR7的表
3、達(dá)與胃癌的浸潤(rùn)深度、TNM分期、淋巴轉(zhuǎn)移、腫瘤大小等臨床病理學(xué)參數(shù)有關(guān)。提示臨床上聯(lián)合檢測(cè)COX-2和CCR7對(duì)胃癌轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)可能會(huì)有所幫助。
第二章、COX-2對(duì)胃癌細(xì)胞CCR7表達(dá)的調(diào)節(jié)
目的:探討COX-2對(duì)胃癌細(xì)胞CCR7表達(dá)的調(diào)節(jié)及其機(jī)制。
方法:用NS-398、PGE2、Con A、EP受體激動(dòng)/抑制劑作用于胃癌細(xì)胞SCG-7901、MGC80-3,RT-PCR、Westem blot在mRNA
4、和蛋白水平檢測(cè)其對(duì)胃癌細(xì)胞CCR7表達(dá)的影響,F(xiàn)ura-2/AM、趨化小室研究NS-398、PGE2、Con A等化合物作用于胃癌細(xì)胞SCG-7901、MGC80-3后,其對(duì)CCL21刺激引起的胞內(nèi)鈣離子內(nèi)流、趨化細(xì)胞和侵襲細(xì)胞的影響。
結(jié)果:在SCG-7901和MGC80-3細(xì)胞,均可檢測(cè)到COX-2高表達(dá),CCR7在兩者有不同程度的表達(dá),EP1、EP2、EP4受體表達(dá)于SCG-7901和MGC80-3細(xì)胞,EP3受體僅表達(dá)
5、于前者。NS-398(10μmol/L)、AH-23848(10μmol/L)能抑制二者CCR7表達(dá),抑制CCL21刺激的鈣離子內(nèi)流和趨化、侵襲能力,而PGE2、Con A的作用則與其相反,SC-19220、17-phenyl trinor PGE2、AH-6809阻斷或激動(dòng)其他EP受體后,沒(méi)有觀察到此變化。說(shuō)明NS-398(10μmol/L)、AH-23848(10μmol/L)能降低SCG-7901、MGC80-3細(xì)胞CCR7的功能
6、性表達(dá),抑制胃癌的轉(zhuǎn)移;PGE2、Con A則能促進(jìn)其功能性表達(dá),促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移。
結(jié)論:在SCG-7901、MGC80-3細(xì)胞,抑制COX-2和EP4受體能下調(diào)CCR7的功能性表達(dá),為進(jìn)一步研究COX-2、CCR7促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移的機(jī)制提供了理論基礎(chǔ),也提示COX-2與CCR7表達(dá)在腫瘤轉(zhuǎn)移中有協(xié)同作用,及他們?cè)谀[瘤干預(yù)治療中的潛在應(yīng)用價(jià)值。
第三章、siRNA-CCR7對(duì)胃癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的影響
目的:體外實(shí)驗(yàn)探
7、討siRNA-CCR7對(duì)胃癌轉(zhuǎn)移的影響及其與VEGF-C、VEGF-D、VEGF-A的關(guān)系。
方法:運(yùn)用siRNA實(shí)驗(yàn)技術(shù),構(gòu)建抑制CCR7表達(dá)的siRNA載體,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染表達(dá)CCR7的胃癌細(xì)胞株SCG-7901、MGC80-3,在mRNA和蛋白水平檢測(cè)其對(duì)胃癌細(xì)胞CCR7的抑制作用和VEGF-C、VEGF-D、VEGF-A表達(dá)的變化;再用鈣離子內(nèi)流、趨化及侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其對(duì)胃癌細(xì)胞趨化、侵襲能力的影響。
結(jié)果:穩(wěn)定轉(zhuǎn)染
8、siRNA1、siRNA2的SCG-7901、MGC80-3細(xì)胞,在mRNA、蛋白水平均能有效抑制胃癌細(xì)胞CCR7的表達(dá),并能抑制CCL21刺激的趨化和侵襲能力。在SCG-7901細(xì)胞,siRNA1、siRNA2能抑制胃癌細(xì)胞CCR7、VEGF-C的表達(dá),不影響SCG-7901、MGC80-3細(xì)胞VEGF-D、VEGF-A的表達(dá)。MGC80-3細(xì)胞沒(méi)有檢測(cè)到VEGF-C的表達(dá)。
結(jié)論:siRNA-CCR7能有效的抑制胃癌細(xì)胞的
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