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![大鼠心肺復蘇后心肌損傷相關血漿microRNA的表達變化研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/16/23/6c4a91f3-8b16-488d-99ae-955e5367c008/6c4a91f3-8b16-488d-99ae-955e5367c0081.gif)
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文檔簡介
1、目的:
采用窒息法建立大鼠心搏驟停-心肺復蘇(CA-CPR)模型,通過實時熒光定量PCR法(RT-PCR)檢測大鼠心肺復蘇(CPR)后心肌損傷相關血漿微小核糖核酸(microRNA)的表達變化,初步探討心肌損傷與血漿microRNA表達變化的關系,并進一步探討血漿microRNA作為心肌損傷標志物的可能性。
方法:
成年雄性Sprague-Dauley(SD)大鼠64只,體重270g-330g之間,采用隨機
2、數(shù)字表法將其分成兩組(N=32),假手術對照組(A組)、心搏驟停-心肺復蘇組(B組),每組再按氣管切開后(A組)或自主循環(huán)恢復(ROSC)后(B組)3小時、6小時、12小時、24小時分為4個亞組(即A3、A6、A12、A24、B3、B6、B12、B24組,n=8)。B組采用窒息法建立CA-CPR模型,A組僅施行麻醉,氣管切開,血管穿刺等操作,不窒息、不復蘇。各亞組于相應時間點取靜脈血,低溫離心后取血漿放置在-80℃冰箱保存,用于提取總R
3、NA,通過實時熒光定量PCR法檢測心肌損傷相關血漿miR-1、miR-21、miR-126、miR-133a、miR-208a、miR-210、miR-320、及miR-499的表達水平,以2-△△Ct計算microRNA的相對表達量,并以相對于A組microRNA的表達升高5倍或下調(diào)0.2倍為明顯變化的標準。
結果:
與A組相比較,B組大鼠候選microRNA在各時間點均有明顯的變化,miR-1,miR-133a,
4、miR-499在各時間點的相對表達量均明顯上升,其中miR-1、miR-133a在ROSC后6小時相對表達量最高,miR-499在ROSC后12h相對表達量最高。miR-126在3h、6h、12h的相對表達量均出現(xiàn)明顯下調(diào),而在24h則出現(xiàn)上調(diào)趨勢,miR-21在各時間點均出現(xiàn)明顯下調(diào)趨勢,其在ROSC后12h相對表達量最低。miR-210、miR-320在3h、6h、12h的相對表達量均出現(xiàn)上調(diào)趨勢,而在24h其相對表達量則出現(xiàn)下調(diào)。
5、miR-208a在假手術組中未檢測到表達(Ct值>40),而在CA-CPR后ROSC組則檢測到其存在,四個時間點檢測到的Ct值分別為34.25±0.76,33.75±0.64,35.93±0.58,37.76±0.96(P<0.05或0.01)。
結論:
1.大鼠CA-CPR后心肌損傷相關血漿miRNA相對表達量有明顯的變化。
2.大鼠CA-CPR后心肌損傷相關血漿miRNA的相對表達量在不同時間點有不同的
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