1、目的：在體外分離、培養(yǎng)食管上皮細(xì)胞，是研究組織工程食管的最基本環(huán)節(jié)。尋找適用于組織工程食管研究的食管上皮細(xì)胞培養(yǎng)方法。 方法：實(shí)驗(yàn)于2007年5月/2007年11月在蘭州大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心完成。①實(shí)驗(yàn)材料：取食管癌患者手術(shù)切除的正常食管長2.0～3.0cm，患者對(duì)實(shí)驗(yàn)知情同意。②實(shí)驗(yàn)方法：獲取可用于組織工程的食管上皮細(xì)胞，常規(guī)傳代培養(yǎng)。⑧實(shí)驗(yàn)評(píng)估：免疫組織化學(xué)染色、倒置相差顯微鏡下觀察培養(yǎng)20min，1～4d細(xì)胞在含血清培養(yǎng)基DM

2、EM+F12(1:1)中的生長情況；四甲基偶氮唑鹽法測(cè)繪1～6d細(xì)胞生長曲線。 結(jié)果：①免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)結(jié)果顯示，90％以上細(xì)胞呈陽性，證明培養(yǎng)的細(xì)胞為食管上皮細(xì)胞。②正常細(xì)胞較大，呈球形懸浮于培養(yǎng)基中；約20min后開始貼壁，1d后大部分細(xì)胞貼壁生長并呈不規(guī)則圓形或多邊形；2d后細(xì)胞開始成簇生長；三四天細(xì)胞達(dá)生長高峰，胞漿豐富，核大而圓。③培養(yǎng)第3天細(xì)胞生長達(dá)高峰，其吸光度值與第1，2，5，6天比較，差異有顯著性意義(P<