1、目的:氧化應(yīng)激參與機(jī)體內(nèi)許多疾病的病理過(guò)程，其中包括慢性阻塞性肺疾病(COPD)，既往的研究顯示氧化應(yīng)激可能在COPD時(shí)膈肌功能異常中發(fā)揮作用，但其中的機(jī)制目前尚不十分明確。本研究旨在探討輕-中度慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者膈肌的超微結(jié)構(gòu)及組織學(xué)改變的特點(diǎn)及內(nèi)源性一氧化氮合酶（NOS）的表達(dá)變化，進(jìn)而揭示一氧化氮(NO)在COPD膈肌功能異常中可能發(fā)揮的作用,明確COPD膈肌功能異?？赡艿臋C(jī)制。
　　方法:對(duì)19例患有肺或食管

2、腫瘤須行開(kāi)胸手術(shù)的患者留取膈肌樣本，其中12例為輕-中度COPD患者，7例為肺功能正常的對(duì)照患者。通過(guò)透射電鏡觀察膈肌組織超微結(jié)構(gòu)的損傷；用免疫組織化學(xué)方法觀察膈肌纖維肌球蛋白重鏈(myosinheavychain，MHC)亞型表達(dá)的改變及肌纖維橫截面積(crosssectionarea,CSA)的變化；以免疫組化方法確定一氧化氮合酶(nitricoxidesynthases,NOS)在膈肌內(nèi)的表達(dá)部位，westernblot法測(cè)定一氧

3、化氮合酶(NOS)及超氧化物亞硝基酪氨酸(nitric-tyrosine,NT)的表達(dá)變化。所有病例均測(cè)量身高和體重，檢測(cè)血清白蛋白含量，來(lái)評(píng)價(jià)營(yíng)養(yǎng)狀況；所有入選患者均進(jìn)行肺功能測(cè)定。
　　結(jié)果:(1)透射電鏡下可見(jiàn)COPD組患者膈肌肌絲排列紊亂及斷裂，可見(jiàn)局灶性肌絲斷裂和溶解；Z線模糊，呈鋸齒狀，A帶和I帶破壞、結(jié)構(gòu)消失；線粒體呈簇狀分布，嵴變形減少，基質(zhì)空亮，部分伴有髓樣變；(2)COPD組患者膈肌細(xì)胞肌球蛋白重鏈(MHC)亞

4、型表達(dá)與對(duì)照組相比無(wú)明顯差異(P>0.05)；(3)COPD組患者膈肌細(xì)胞橫截面積(CSA)與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異(P>0.05),中度COPD患者的I型纖維的CSA與對(duì)照組相比顯著減少(P<0.05)；(4)COPD組患者膈肌細(xì)胞MHCslow和MHCfast蛋白表達(dá)均降低(P<0.05)，MHC蛋白表達(dá)與肺功能FEV1％predicted呈正相關(guān)；(5)COPD組患者膈肌細(xì)胞內(nèi)nNOS和iNOS蛋白表達(dá)均明顯升高(P<0.05)，而

5、eNOS蛋白表達(dá)在對(duì)照組與病例組之間無(wú)顯著差異；(6)COPD組患者膈肌細(xì)胞內(nèi)亞硝基酪氨酸(NT)蛋白表達(dá)明顯升高(P<0.05)；(7)NOS和NT表達(dá)均與肺功能FEV1%predicted呈負(fù)相關(guān)。
　　結(jié)論:在輕-中度COPD患者中，膈肌纖維的適應(yīng)性變化發(fā)生之前就已經(jīng)存在超微結(jié)構(gòu)的損傷和膈肌纖維的萎縮，膈肌內(nèi)源性NOS表達(dá)升高，使NO生成過(guò)量，引起超氧化物亞硝基酪氨酸（NT）產(chǎn)生增加，進(jìn)而造成膈肌內(nèi)功能蛋白的損傷，可能在膈肌