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![PP2A對(duì)大鼠脊髓損傷后星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移和神經(jīng)軸突生長(zhǎng)的調(diào)節(jié)研究.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/368fe1b8-f400-47c9-8087-4ee64ce005aa/368fe1b8-f400-47c9-8087-4ee64ce005aa1.gif)
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1、目的:蛋白磷酸酯酶2A(PP2A)是哺乳動(dòng)物細(xì)胞中一種主要的絲氨酸-蘇氨酸磷酸酯酶,大量存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)中。但其在中樞系統(tǒng)損傷中的作用仍不清楚。本文旨在研究PP2A對(duì)大鼠脊髓損傷后星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移和神經(jīng)軸突生長(zhǎng)的調(diào)節(jié)作用,從而明確其修復(fù)脊髓損傷的內(nèi)在機(jī)制。
方法:采用Allen法建立SD大鼠脊髓損傷模型,BBB量表評(píng)分大鼠判定脊髓損傷程度。造模成功后,無(wú)菌條件分離和培養(yǎng)背根神經(jīng)元細(xì)胞及小腦顆粒神經(jīng)元,免疫熒光染色后檢測(cè)神經(jīng)軸
2、突生長(zhǎng)情況。對(duì)損傷脊髓進(jìn)行石蠟切片處理,對(duì)切片行免疫熒光染色,激光共聚焦顯微鏡下觀察PP2A表達(dá)情況。同時(shí)V2460法檢測(cè)PP2A磷酸化水平檢測(cè),評(píng)價(jià)PP2A活性。將PP2A載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)染N2a細(xì)胞,V2460法檢測(cè)PP2A活性及Western blot法檢測(cè)PP2A蛋白表達(dá)情況。
結(jié)果:在研究中,在脊髓損傷(SCI)后,Tyr-307磷酸化PP2A(PP2A的非活性形式)的表達(dá)迅速上調(diào)。此外,在培養(yǎng)的神經(jīng)元中高表達(dá)的硫酸軟骨素
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