1、目的：研究人臍帶血中兩種類型內(nèi)皮祖細胞的體外分化特征。 方法：采用6％羥乙基淀粉沉降法和密度梯度離心法聯(lián)合分離臍帶血中單個核細胞，在含有血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。通過形態(tài)學、免疫熒光、逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(RT-PCR)和流式細胞法分析細胞的生長特點和生物學特征。 結(jié)果：貼壁細胞分為早期內(nèi)皮祖細胞和晚期內(nèi)皮祖細胞兩種類型細胞。早期內(nèi)皮祖細胞的形態(tài)從小的圓形細胞變成以集落

2、為中心，周圍呈發(fā)芽式向外生長的細胞群，晚期內(nèi)皮祖細胞形成典型的“鋪路石樣”。DiL標記的乙?；兔芏戎鞍?DiL-acLDL)和FITC標記荊豆凝集素I(FITC-UEA-I)雙染色陽性細胞初步鑒定為內(nèi)皮祖細胞。RT-PCR提示隨著培養(yǎng)時間延長，內(nèi)皮特異性基因表達變化逐漸增強，流式細胞分析提示早期：EPC有AC133、CD34、KDR表達；晚期EPCsAC133不表達，CD34表達弱，KDR表達增強。四甲基偶氮唑藍(MTT)比色法提示