1、目的：研究缺血預(yù)處理可否通過上調(diào)凋亡抑制基因Bcl-2、下調(diào)凋亡促進(jìn)基因Bax的表達(dá)而減少因凋亡引起的肝內(nèi)外膽管的損傷，同時(shí)比較5分鐘時(shí)限、10分鐘時(shí)限缺血預(yù)處理后的Bcl-2/Bax比值是否有差別，并根據(jù)比值差異分析何種時(shí)限缺血預(yù)處理方式對(duì)抵抗膽管缺血再灌注損傷更有利。 方法：健康雄性SD大鼠40只，按Chien CT等的方法建立肝臟原位缺血再灌注模型，分為四組：假手術(shù)組(SO)、直接缺血60分鐘組(IR)、5分鐘時(shí)限缺血預(yù)處

2、理組(IP5)、10分鐘時(shí)限缺血預(yù)處理組(IP10)。術(shù)后24小時(shí)腹主動(dòng)脈采血測(cè)定生化指標(biāo)，取肝左葉組織分別用免疫組化染色及原位雜交染色的方法測(cè)定其中Bcl-2、Bax蛋白及其基因。并對(duì)肝臟標(biāo)本進(jìn)行TUNEL染色識(shí)別典型凋亡細(xì)胞計(jì)算凋亡指數(shù)AI。所得數(shù)據(jù)以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，組間比較采用單因素方差分析和SNK法進(jìn)行兩兩比較，以P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；IP組間以P<0.10為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果：SO組、IR組及IP各

3、組模型建立成功，假手術(shù)組發(fā)生凋亡的膽管上皮細(xì)胞少，IR組凋亡的膽管上皮細(xì)胞增多，IP組發(fā)生凋亡的膽管上皮細(xì)胞數(shù)相對(duì)于IR組又減少(P<0.05)。膽管上皮細(xì)胞凋亡抑制基因Bcl-2的mRNA和蛋白的表達(dá)在假手術(shù)組表達(dá)較低，在IR及IP各組表達(dá)均增高，其中IR組表達(dá)較IP組表達(dá)降低，同時(shí)IP組間以5分鐘時(shí)限IP組較10分鐘IP組Bcl-2的mRNA和蛋白表達(dá)略高P<0.10)，故認(rèn)為缺血預(yù)處理時(shí)限以5分鐘為宜、且5分鐘缺血預(yù)處理過程即可得

4、到滿意效果；凋亡促進(jìn)基因Bax的mRNA和蛋白的表達(dá)在假手術(shù)組表達(dá)低(P<0.05)，而在IR及IP各組表達(dá)雖有差異但并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.10)，這個(gè)結(jié)果提示IP可以上調(diào)凋亡抑制基因Bcl-2而發(fā)揮對(duì)膽管上皮的保護(hù)作用，而凋亡促進(jìn)基因Bax表達(dá)與保護(hù)作用無直接關(guān)系。 結(jié)論： 1.肝臟缺血再灌注引發(fā)膽管上皮細(xì)胞凋亡。 2.常溫下缺血預(yù)處理可以減輕肝臟缺血再灌注損傷中膽管損傷。 3.缺血預(yù)處理對(duì)膽管上皮細(xì)