1、[目的]
　　 研究Skp2在大鼠主動脈球囊損傷后動態(tài)表達(dá)及其與血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)增殖的關(guān)系，并探討其對內(nèi)膜增生作用的可能機(jī)制，為Skp2作為治療血管成形術(shù)后再狹窄的新靶點(diǎn)提供理論基礎(chǔ)。
　　 [方法]
　　 健康SD雄性大鼠56只，隨機(jī)分為假手術(shù)組(8只)和單純球囊損傷組(48只，包括2d、4d、7d、10d、14d、28d組)。2F Fogarty導(dǎo)管造成大鼠主動脈損傷，建立動物模型。各組分別于術(shù)后2

2、、4、7、10、14、28天手術(shù)切取損傷主動脈作為實(shí)驗標(biāo)本。分別進(jìn)行下列檢測：(1)血管形態(tài)學(xué)檢測：病理切片HE染色，光鏡下觀察血管內(nèi)膜增生情況，并在計算機(jī)圖像分析儀下測量、分析血管內(nèi)膜面積；(2)SP染色法免疫組織化學(xué)檢測PCNA、Skp2、p27Kipl表達(dá)。高倍光鏡下觀察并計算陽性細(xì)胞百分比，觀察術(shù)后不同時間Skp2、p27Kipl與PCNA表達(dá)變化的關(guān)系。(3)Real Time RT-PCR檢測各組Skp2和p27Kipl在m

3、RNA水平的表達(dá)情況。(4)Western blotting檢測各組Skp2和p27Kipl蛋白表達(dá)情況，觀察其動態(tài)變化。
　　 [結(jié)果]
　　 1.球囊損傷后血管內(nèi)膜開始增生，血管內(nèi)膜面積與中膜面積(IA/MA)比值隨著時間的推移逐漸升高，28天達(dá)到高峰(與假手術(shù)組比較，P<0.01)。
　　 2.免疫組化染色結(jié)果顯示：(1)正常動脈幾乎無PCNA陽性細(xì)胞表達(dá)，損傷術(shù)后2天開始出現(xiàn)PCNA陽性的VSMC細(xì)胞表達(dá)

4、，并逐漸增多，至7天時達(dá)到高峰，此后表達(dá)逐漸下降，28天時內(nèi)膜僅有少量表達(dá)，但仍高于正常水平(P<0.05)。(2)在正常動脈中Skp2陽性表達(dá)極低，術(shù)后2天表達(dá)開始升高，至10天時達(dá)高峰，術(shù)后14天迅速回落，28天降至最低，但仍高于正常水平(P<0.05)。(3)正常動脈中p27Kipl陽性細(xì)胞表達(dá)明顯，術(shù)后2天明顯下降，4天至7天表達(dá)仍較低，10天時p27Kipl陽性細(xì)胞表達(dá)迅速增加(P<0.05)，且以內(nèi)膜為主。14天和28天維持

5、在較高水平，與10天組相比，無顯著性差異(P>0.05)。(4)Skp2和PCNA表達(dá)呈明顯正相關(guān)(r=0.892，P<0.01)。
　　 3.Real Time RT-PCR和Western blotting結(jié)果顯示正常動脈Skp2 mRNA和蛋白表達(dá)極低，術(shù)后2天Skp2 mRNA和蛋白表達(dá)開始升高，至10天時達(dá)到高峰(P<0.01)。14天后Skp2 mRNA和蛋白表達(dá)量開始下降，至28天進(jìn)一步下降，但仍明顯高于假手術(shù)組(

6、P<0.05)。p27Kipl mRNA和蛋白在正常動脈中可見表達(dá)，術(shù)后4天p27Kipl mRNA和蛋白表達(dá)明顯減少(P<0.05)。7天至10天時p27Kipl mRNA表達(dá)仍較低，14天p27Kipl mRNA表達(dá)明顯升高，至28天時p27Kipl mRNA恢復(fù)至正常水平(P>0.05)。而p27Kipl蛋白于術(shù)后7天時表達(dá)已開始升高，至28天時達(dá)到高峰(P<0.05)。
　　 [結(jié)論]
　　 1.球囊損傷后動脈出