1、惡性腫瘤是嚴(yán)重威脅人類健康的重大疾病之一,近些年在中國(guó)乃至世界上,惡性腫瘤呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。據(jù)WHO專家預(yù)測(cè),腫瘤將會(huì)成為21世紀(jì)人類第一殺手。研究表明,在惡性腫瘤分化、發(fā)生發(fā)展過(guò)程中是經(jīng)歷了多步驟的過(guò)程,從不典型增生到原位癌、浸潤(rùn)癌,在分子水平上有許多改變,包括生長(zhǎng)因子/受體基因等表達(dá)在一些惡性腫瘤中已經(jīng)提示為癌變的一個(gè)重要因素,尋求一種新的腫瘤標(biāo)志物,并闡明它與惡性腫瘤生物學(xué)特性的關(guān)系,為惡性腫瘤的早期診斷以及治療提供理論依據(jù)顯得尤為迫

2、切。近年來(lái),相繼克隆出多種與腫瘤發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因,其中中期因子(Midkine,MK)是一種新發(fā)現(xiàn)的肝素結(jié)合性生長(zhǎng)因子,首先在視磺酸誘導(dǎo)分化早期的胚胎瘤中被發(fā)現(xiàn),但與其它肝素結(jié)合性生長(zhǎng)因子性質(zhì)截然不同。在多種腫瘤中,與周圍非癌組織相比,中期因子在腫瘤組織中出現(xiàn)過(guò)表達(dá),如乳腺癌、胃癌、肺癌、肝癌、卵巢癌、膀胱癌、結(jié)腸癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、Wilm’s瘤等。中期因子除在惡性腫瘤組織中有高表達(dá)外,在腫瘤早期、潛伏期和癌前病變階段也

3、呈高水平表達(dá)。目前大量的研究表明它與多種腫瘤生長(zhǎng)、分化、血管生成、侵襲、轉(zhuǎn)移及預(yù)后有關(guān)。腫瘤細(xì)胞要實(shí)現(xiàn)侵襲和轉(zhuǎn)移,首先必須突破由基底膜(basement membrane,BM)和細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)構(gòu)成的組織屏障。乙酰肝素(heparan sulfate,HS)又稱硫酸肝素蛋白多糖(heparan sulfate proteoglycan,HSPG)是細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)和細(xì)胞表面的生物大分子

4、,是基底膜(BM)的主要構(gòu)成成分。肝素酶(heparanase,HPA)是一種葡萄糖苷酸內(nèi)切酶,可水解乙酰肝素側(cè)鏈與其核心蛋白相連的糖苷鍵,直接破壞ECM和BM。近來(lái)的研究發(fā)現(xiàn),肝素酶不僅可以特異性地降解該屏障的主要成分—硫酸乙酰肝素蛋白多糖(heparansulfate proteoglycan,HSPG),還能協(xié)同多種因子,通過(guò)多條途徑直接和間接地促進(jìn)腫瘤的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移,因而成為近年來(lái)腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制和對(duì)策研究的熱點(diǎn)。中國(guó)是世界上食管癌發(fā)

5、病率和死亡率最高的國(guó)家,河南省食管癌發(fā)病率和死亡率均居中國(guó)首位,而浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致食管癌患者死亡的主要原因,因此探討食管癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移機(jī)制已成為研究的熱點(diǎn)之一。有關(guān)MK及HPA在食管鱗癌組織中的表達(dá)及意義的研究,至今國(guó)內(nèi)外鮮見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道,為進(jìn)一步探討MK及HPA表達(dá)與食管癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的關(guān)系,尋找診斷及抑制食管癌浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的有效方法,提高食管癌患者的生存時(shí)間、降低死亡率。本研究采用免疫組化SP法,分別觀察了高發(fā)區(qū)4

6、9例食管鱗癌組織、20例癌旁不典型增生組織及49例正常粘膜組織中MK及HPA蛋白的表達(dá)情況,二者的聯(lián)合檢測(cè)為進(jìn)一步探討食管癌的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移機(jī)制,有效地阻斷食管癌的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移提供了理論基礎(chǔ)。方法1.采用免疫組化SP法分別對(duì)49例食管鱗癌組織、20例癌旁不典型增生組織及49例正常食管粘膜組織中MK及HPA蛋白的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。2.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:所有數(shù)據(jù)均經(jīng)SPSS11.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。陽(yáng)性率之間的比較大樣本采用x~2檢驗(yàn)(chi-square)小

7、樣本采用Fisher精確檢驗(yàn);兩變量之間的關(guān)系分析采用spearman等級(jí)相關(guān)分析表示。顯著性水準(zhǔn)α=0.05。結(jié)果1.正常食管粘膜組織中MK蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為0.00％(0/49),不典型增生組織中MK蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為50.00%(10/20),食管鱗癌組織中MK蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為79.59%(39/49);食管鱗癌組織中MK蛋白陽(yáng)性表達(dá)率與相應(yīng)的癌旁不典型增生組織及正常食管粘膜組織兩兩相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。2.正常食

8、管粘膜組織中HPA蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為0.00%(0/49)。不典型增生組織中HPA蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為55.00%(11/20),食管鱗癌組織中HPA蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為65.31%(32/49);食管鱗癌組織中HPA蛋白表達(dá)與癌旁不典型增生組織相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)3.21例伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管鱗癌組織中MK蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為95.24%(20/21),無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的28例食管鱗癌組織中MK蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為67.86%(19/28

9、),兩組間食管鱗癌組織中MK蛋白陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。4.21例伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管鱗癌組織中HPA蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為100%(21/21),無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的28例食管鱗癌組織中HPA蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為39.29%(11/28),兩組間食管鱗癌組織中HPA蛋白陽(yáng)性率比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。5.無(wú)浸潤(rùn)、浸潤(rùn)達(dá)淺肌層、深肌層和食管外膜的食管鱗癌組織中MK蛋白陽(yáng)性率分別為:40.00%(2/5)、57.14%(4/

10、7)、77.78%(14/18)和100%(19/19)。浸潤(rùn)達(dá)外膜的食管鱗癌組織中MK蛋白陽(yáng)性率明顯高于前三者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而浸潤(rùn)達(dá)深肌層的食管鱗癌組織中MK蛋白陽(yáng)性表達(dá)率與浸潤(rùn)達(dá)淺肌層相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。6.無(wú)浸潤(rùn)、浸潤(rùn)達(dá)淺肌層、深肌層和食管外膜的食管鱗癌組織中HPA蛋白陽(yáng)性率分別為:20.00%(1/5)、42.86%(3/7)、50.00%(9/18)和100%(19/19),浸潤(rùn)達(dá)食管外

11、膜的食管鱗癌組織中HPA蛋白陽(yáng)性率明顯高于前三者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而浸潤(rùn)達(dá)深肌層的食管鱗癌組織中HPA蛋白陽(yáng)性表達(dá)率與浸潤(rùn)達(dá)淺肌層相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。7.MK蛋白及HPA蛋白在食管鱗癌中的表達(dá)相關(guān)性經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示,兩者之間呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.01)。結(jié)論1.食管鱗癌組織、癌旁不典型增生組織及正常食管粘膜組織中MK蛋白陽(yáng)性表達(dá)率均依次降低,三者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,表明MK參與食管鱗癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程

12、。2.正常食管粘膜組織中HPA蛋白表達(dá)為陰性。食管鱗癌組織中HPA蛋白陽(yáng)性表達(dá)率較癌旁不典型增生組織中稍高,但兩者相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,表明HPA與食管鱗癌的發(fā)生發(fā)展無(wú)密切關(guān)系。3.隨著食管鱗癌細(xì)胞浸潤(rùn)深度的加深,MK、HPA蛋白陽(yáng)性表達(dá)率逐漸升高,且浸潤(rùn)達(dá)食管外膜層的食管鱗癌組織中MK、HPA蛋白陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于無(wú)浸潤(rùn)、浸潤(rùn)達(dá)淺肌層和深肌層的相應(yīng)組織;MK、HPA蛋白陽(yáng)性表達(dá)率在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組。提示MK、HPA與食管