1、第四軍醫(yī)大學碩士學位論文熱化療對轉CD基因結腸癌細胞SW480的殺傷作用姓名：李金茂申請學位級別：碩士專業(yè)：外科學（普通外科）指導教師：馬慶久賴大年2003.6.1第四軍醫(yī)大學碩士學位論文熱化療對轉CD基因結腸癌細胞SW480的殺傷作用碩士研究生李金茂導師馬慶久教授賴大年教授指導老師魯建國副教授第四軍醫(yī)大學唐都醫(yī)院普通外科西安710038中文摘要目的探討溫熱療法能否增加前藥5FC對轉CD基因結腸癌細胞的靶向性殺傷作用及作用機制。／方法《

2、、脂質體法將含CD基因的逆轉錄病毒載體G1CEACDNa直接轉染大腸癌SW480細胞，PCR分析目的基因整合，RTPCR方法檢測目的基因表達；將轉染G1CEACDNa之SW480細胞及未轉基因之SW480細胞接種到96孔細胞培養(yǎng)板中，接種同時加入含各種梯度濃度的前藥5FC，熱療組分別于加入5FC的同時在43“C下熱療30rain，對照組不熱療，第8d去除培養(yǎng)液，以MTT法測定活細胞比率并計算殺傷率，分析前藥熱療對轉基因腫瘤細胞的殺傷作用

3、。此外，分別于加入5FC的同時在41℃、42℃、43“(2、44℃、45“(2、60。C下熱療30rain，以及在加入5FC的同時在43“C下熱療10rain、20min、30min、40min、50min、lh，以探討前藥5FC的最適溫度與時間。流式細胞術分析熱化療對腫瘤細胞周期的影響，透射電鏡觀測熱化療前后腫瘤細胞結構的改變。結果脂質體法成功將G1CEACDNa轉染入大腸癌SW480細胞，PCR檢測表明目的基因整合到靶細胞中，RTP