1、Fas又稱APO-Ⅰ,現(xiàn)命名為CD95分子,是一種能夠傳遞死亡信號的細胞表面分子,屬于腫瘤壞死因子受體家族成員,是一種Ⅰ型細胞膜蛋白,其天然配體為FasL,屬于腫瘤壞因子家族成員,是一種Ⅱ型跨膜蛋白,通常表達于T細胞、巨噬細胞及角膜等少數(shù)免疫特赦部位,當Fas與FasL結(jié)合就會導(dǎo)致細胞凋亡.在腫瘤免疫中人們過去認為Fas-FasL途徑是CTL殺傷腫瘤的作用機制之一,但最近研究發(fā)現(xiàn)一些腫瘤細胞如肝癌、結(jié)腸癌細胞也表達FasL,但并不介導(dǎo)腫

2、瘤細胞自身凋亡卻能借助FasL-Fas途徑反殺傷活化的腫瘤浸潤淋巴細胞(TIL),這也是腫瘤免疫逃避的新機制.反殺傷機理的研究可望開辟腫瘤免疫治療的新途徑.長期以來腫瘤免疫治療研究的著眼點多集中在如何激活淋巴細胞特別是T細胞,但激活的T細胞膜表面Fas表達上調(diào),較靜止T細胞更易受致腫瘤細胞的反殺傷.因此我們認為不克服腫瘤細胞的免疫反殺傷,免疫治療就會失敗.由于FasL抗體能競爭性地與FasL結(jié)合從而有效阻斷FasL-Fas途徑傳遞死亡信

3、號.因此,FasL抗體具有保護T細胞免受腫瘤細胞的免疫反殺傷作用.這一研究潛在的社會效益和經(jīng)濟效益頗大.根據(jù)上述理論,國外有學(xué)者進行過動物實驗并觀察到反殺傷作用的存在.而臨床研究國內(nèi)外均未見報道.因此,我們用病人手術(shù)切除之新鮮腫瘤組織作為標本分離制備淋巴細胞和腫瘤細胞并分別作靶細胞和效應(yīng)細胞,觀察腫瘤細胞對淋巴細胞的反殺傷作用,實驗結(jié)果更貼近臨床.基于上述認識,該課題從以下幾個方面展開了研究:①分析非小細胞肺癌(NSCLC)中肺腺癌及腺

4、癌細胞株A<,549> FasL的表達情況及其臨床意義;②檢測肺腺癌細胞及腺癌細胞株A<,549>對TIL的殺傷活性及FasL抗體對TIL的保護作用;③檢測肺癌患者外周血中sFas及sFasL的表達情況及臨床意義.通過以上研究,我們發(fā)現(xiàn):1.肺腺癌及腺癌細胞株A<,549> FasL的表達.8例肺腺癌患者中,FasL表達陽陽性率為80.2﹪,而腺癌細胞株A<,549>的陽性表達率也達到了68.4﹪.提示肺腺癌細胞及A<,549>細胞具有

5、反殺傷免疫細胞的能力.并推測有可能是肺腺癌易發(fā)生轉(zhuǎn)移的重要原因之一.2.肺腺癌細胞及A<,549>對TIL的殺傷作用及FasL抗體對TIL的保護作用.肺腺癌細胞及A<,549>培養(yǎng)1~2周后,用MTT法測定其對TIL的殺傷活性.8例經(jīng)IL-2培養(yǎng)的肺腺癌細胞及A<,549>均對肺癌組織分離培養(yǎng)的TIL細胞有不同程度的殺傷作用.但經(jīng)FasL抗體封閉后的腫瘤細胞對TIL的殺傷作用均有所下降,兩組之間存在顯著差異(p<0.05).3.肺癌患者

6、外周血sFas及sFasL的表達.18例肺癌患者(其中鱗癌8例,小細胞癌1例,低分化癌2例,腺癌7例),sFas及sFasL的水平顯著高于正常人(8例健康志愿者).提示:可溶性Fas與膜Fas競爭性地與FasL結(jié)合,抑制腫瘤細胞凋亡.可溶性FasL可能通過轉(zhuǎn)式機制導(dǎo)致別的表達Fas的免疫細胞發(fā)生凋亡.從而使腫瘤細胞躲避免疫攻擊.通過該研究,我們得出如下結(jié)論:1)肺腺癌細胞及A549細胞高度表達FasL;2)肺腺癌細胞及A<,549>細胞