1、以昆明雌性小白鼠為受試動(dòng)物，將體外培養(yǎng)至擴(kuò)張囊胚(hCG后113h)的小鼠胚胎分別施以38℃溫和熱應(yīng)激和40℃強(qiáng)烈熱應(yīng)激處理1h，2h和3h，然后在37℃正常培養(yǎng)條件下分別恢復(fù)3h，2h和1h，用體視顯微鏡觀察hCG后161h的囊胚孵出率以及經(jīng)38℃和40℃誘導(dǎo)熱應(yīng)激后囊胚的孵出率，用Western blot技術(shù)檢測小鼠囊胚HSP70及HSP72的表達(dá)，以研究小鼠囊胚的熱敏性、熱應(yīng)激對小鼠囊胚HSP70及HSP72表達(dá)的影響以及囊胚熱耐

2、受的獲得與HSP72表達(dá)之間的關(guān)系。試驗(yàn)結(jié)果如下： 1.熱應(yīng)激對囊胚孵出率的影響。熱應(yīng)激組囊胚孵出率均低于對照組，40℃熱應(yīng)激處理不同時(shí)間各組囊胚孵出率(分別為58.53％，47.85％和45.28％)均低于38℃熱應(yīng)激處理的各相應(yīng)組(分別為62.98％，57.35％和51.27％)。熱應(yīng)激處理2h和3h時(shí)，40℃熱應(yīng)激組的囊胚孵出率(分別為47.85％和45.28％)顯著(P<0.05)低于38℃熱應(yīng)激組(57.35％和51.

3、27％)；熱應(yīng)激處理1h時(shí)，囊胚孵出率在38℃和40℃組間無顯著差異(P>0.05)。 在38℃和40℃熱應(yīng)激組，囊胚孵出率均隨著熱應(yīng)激時(shí)間的延長而降低。38℃組內(nèi)熱應(yīng)激處理1h，2h和3h囊胚孵出率分別為62.98％，57.35％和51.27％，三組之間差異顯著(P<0.05)；40℃熱應(yīng)激處理1h囊胚孵出率(58.53％)顯著(P<0.05)高于熱應(yīng)激處理2h(47.85％)和3h(45.28％)；囊胚孵出率在40℃熱應(yīng)激處

4、理2h(47.85％)和3h(45.28％)之間無顯著差異(P>0.05)。 2.誘導(dǎo)熱應(yīng)激對囊胚孵出率的影響。先經(jīng)38℃熱誘導(dǎo)1h，2h和3h，再經(jīng)40℃強(qiáng)烈熱應(yīng)激處理2h后囊胚的孵出率(49.18％，54：74％和53.36％)均高于40℃強(qiáng)烈熱應(yīng)激處理2h組(47.85％)。其中38℃熱誘導(dǎo)2h囊胚孵出率最高(54.74％)，與40℃強(qiáng)烈熱應(yīng)激處理2h組(47.85％)相比差異顯著(P<0.05)。 3.熱應(yīng)激對囊

5、胚HSP70表達(dá)的影響。38℃熱應(yīng)激組內(nèi)，囊胚HSP70表達(dá)量隨熱應(yīng)激時(shí)間的延長呈增加趨勢。38℃熱應(yīng)激處理3h囊胚HSP70表達(dá)量(1.11)顯著(P<0.05)高于對照組(0.94)；38℃熱應(yīng)激處理1h和2h襲胚HSP70表達(dá)量(0.96和0.97)與對照組(0.94)相比無顯著差異(P>0.05)。 40℃熱應(yīng)激組囊胚HSP70表達(dá)量隨熱應(yīng)激時(shí)間的延長先減少后增加。40℃熱應(yīng)激處理1h和3h囊胚HSP70表達(dá)量(1.17和1.1

6、3)均顯著(P<0.05)高于對照組0.97的表達(dá)量；40℃熱應(yīng)激處理2h囊胚HSP70表達(dá)量(0.92)與對照組(0.97)相比無顯著差異(P>0.05)。 4.熱應(yīng)激對囊胚HSP72表達(dá)的影響。對照組和38℃、40℃熱應(yīng)激組的囊胚均有HSP72的表達(dá)。其中，38℃熱應(yīng)激處理211囊胚HSP72表達(dá)量(0.85)顯著(P<0.05)高于對照組(0.66)；38℃熱應(yīng)激處理1h和3h囊胚HSP72表達(dá)量(0.72和0.78)均高