1、本實驗應(yīng)用免疫組化方法對TGF β s受體T β RⅠ、T β RⅡ在小鼠胚胎心臟發(fā)育過程中的時空表達規(guī)律進行了研究。 研究方法：應(yīng)用光鏡石蠟連續(xù)切片，免疫組化PAP法，用抗TGF β 1、抗T β RⅠ和抗T β RⅡ多克隆抗體，以及抗α-SMA、抗α-SCA單克隆抗體對胚齡9-14天小鼠胚胎心臟連續(xù)切片進行了染色。 研究結(jié)果：胚胎發(fā)育至第9天，原始心管為單一管狀結(jié)構(gòu)，外包心肌，腔面襯有內(nèi)皮，內(nèi)皮與心肌之間的心膠質(zhì)中尚

2、未出現(xiàn)間充質(zhì)細胞。原始心管的流出道，原始心室、心房心肌均顯較強的α-SMA．和α-SCA表達。TGF β 1、T β RⅠ與T β RⅡ在流出道心肌的表達呈陰性，僅在流出道近心室部心肌可見較弱的T β RⅠ陽性顆粒。TGF β 1、T β RⅠ和T β RⅡ在心室、心房均呈顆粒狀表達，陽性顆粒主要位于近腔面的心肌細胞，但T β RⅠ和T β RⅡ的表達強度較TGF β 1高，尤以心室表達明顯，隨心肌向流入道端移行，表達強度逐漸降低。

3、 胚胎發(fā)育第10天，心肌性流出道長度明顯增加，流出道心肌的遠側(cè)界位于和心包腔背側(cè)壁臟壁中胚層上皮的反折處，顯較強α-SCA和α-SMA表達。TGF β 1，T β RⅠ與T β RⅡ在流出道心肌呈陽性表達，尤以右側(cè)壁明顯，但隨流出道心肌向動脈端延伸，表達逐漸減弱，和α-SCA、α-SMA染色相比，T β RⅠ與T β RⅡ表達尚未完全到達流出道動脈端心肌。TGFβ1、T β RⅠ和T β RⅡ在心室和心房的表達明顯增強，T β RⅠ

4、的表達強度明顯高于TGF β 1和T β RⅡ。靜脈竇左右角明顯可見，α-SMA和α-SCA的表達沿靜脈竇左右角背側(cè)壁延伸至心背系膜反折處。TGF β 1、T β RⅠ和T β RⅡ的表達主要集中在靜脈竇左角，在靜脈竇右角和心背系膜，三種蛋白質(zhì)的表達陰性或弱陽性。胚胎發(fā)育第11-12天，TGFβ1、TβRⅠ、TβRⅡ和α-SMA在心臟不同部位的表達達高峰并延伸至竇房結(jié)心肌。流出道長度進一步增加，但α-SCA表達在流出道遠端明顯減弱。TG

5、Fβ1、TβRⅠ與TβRⅡ在流出道和α-SMA的表達模式基本相同，其遠端均達心包腔背側(cè)壁臟壁中胚層上皮和流出道的反折處。流出道心內(nèi)膜墊中α-SMA陽性間充質(zhì)細胞顯示較強的TβRⅡ表達，房室管表面的內(nèi)皮細胞及心內(nèi)膜墊間充質(zhì)細胞均顯較強的TGFβ1、TβRⅠ和TβRⅡ表達。胚胎發(fā)育第11天始，動脈囊、弓動脈壁以及升主動脈和肺動脈干壁顯較強的α-SMA染色，提示平滑肌細胞開始發(fā)育，但TGFβ1、TβRⅠ與TβRⅡ在流出道的表達始終限于心肌細胞

6、。胚胎發(fā)育至12天晚，TGFβ1、TβRⅠ和TβRⅡ在心臟各部的表達開始下降。胚胎發(fā)育第14天，TGFβ1、TβRⅠ和TβRⅡ的表達已局限于右心室部分致密心肌和小梁心肌。 研究結(jié)論：本實驗結(jié)果證明，TGFβs受體TβRⅠ和TβRⅡ在小鼠胚胎心臟發(fā)育過程中的表達具時空特異性，TβRⅠ和TβRⅡ的表達模式和TGFβs的表達模式相同。胚胎發(fā)育第9-10天，TβRⅠ和TβRⅡ的表達主要集中在原始心室心肌，在流出道和靜脈竇右角，可見α-S

7、CA和α-SMA表達陽性的心肌細胞，但TGFβ1、TβRⅠ和TβRⅡ表達陰性，提示TGFβ信號系統(tǒng)的表達是在間充質(zhì)細胞向心肌細胞分化以后，TGFβ信號系統(tǒng)并不影響心肌細胞的早期定向分化。TGFβ1、TβRⅠ和TβRⅡ集中表達在9-14天胚胎心臟的心肌和心內(nèi)膜墊組織，提示Tβ RⅠ和TβRⅡ不但調(diào)節(jié)心肌細胞的增生和進一步分化，同時在心臟成袢和外形建立過程，內(nèi)部分隔時心內(nèi)膜墊的內(nèi)皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化、心內(nèi)膜墊間充質(zhì)細胞的增生以及神經(jīng)嵴細胞向流出道