1、目的:體外研究表皮生長因子受體(Epidermal growth factor receptor,EGFR)抑制劑吉非替尼(Gefitinib)和雷帕霉素靶蛋白(Mammalian target of rapamycin,mTOR)抑制劑依維莫司(Everolimus)在gefitinib耐藥鼻咽癌細胞中聯(lián)合作用的效果及機制。
　　方法:MTT法測定單藥及聯(lián)合用藥對人鼻咽癌細胞株HONE1的增殖抑制;流式細胞術(shù)檢測藥物單獨或聯(lián)合作

2、用于HONE1細胞株48h、72h后,各組細胞凋亡及周期分布的改變;Western Blot檢測單藥及聯(lián)合用藥48h后,HONE1細胞中磷酸化AKT(Phospho-AKT,p-AKT)和磷酸化S6K(Phospho-S6K,p-S6K)表達水平的變化。
　　結(jié)果:MTT法結(jié)果顯示gefitinib和everolimus對HONE1細胞的生長抑制均呈劑量依賴性,并由此計算出,gefitinib的IC50為17.92μmol/L,e

3、verolimus的IC50為2.46nmol/L,但二者的聯(lián)合作用并沒有表現(xiàn)出明顯的協(xié)同效應(yīng)(P>0.05);流式細胞術(shù)顯示gefitinib及everolimus作用于HONE1細胞時,可誘導(dǎo)凋亡,引起G0/G1期細胞阻滯,兩種作用均具有時間依賴性,而二者聯(lián)合的效果并未表現(xiàn)出明顯的優(yōu)勢(P>0.05);Western Blot顯示gefitinib對p-AKT抑制作用不明顯,everolimus可下調(diào)p-S6K的表達,但同時上調(diào)了p