大白菜軟腐病抗性相關(guān)功能基因分子標(biāo)記的開發(fā)及其遺傳定位.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、大白菜是十字花科蕓薹屬重要植物,是我國及東亞地區(qū)冬春兩季的重要蔬菜。軟腐病是危害大白菜的三大重要病害之一,病原菌主要為胡蘿卜軟腐歐文氏菌胡蘿卜亞種Erwinia.carotovota.subsp.carotovora(簡稱Ecc)。它在田間發(fā)病較重并造成嚴(yán)重減產(chǎn)和品質(zhì)下降,是制約大白菜生產(chǎn)的重要因素。在白菜軟腐防御反應(yīng)相關(guān)基因研究基礎(chǔ)上,開展大白菜軟腐病抗性相關(guān)功能基因分子標(biāo)記的開發(fā)和遺傳定位,為分離軟腐病抗性基因及大白菜抗軟腐病分子標(biāo)

2、記輔助育種奠定基礎(chǔ)。 本研究在具有自主產(chǎn)權(quán)的大白菜各種抗病基因、抗逆境基因、防衛(wèi)反應(yīng)基因以及與抗病有關(guān)的各種信號傳導(dǎo)基因和轉(zhuǎn)錄因子基因的ESTs資源基礎(chǔ)上,基于生物信息學(xué)方法,設(shè)計(jì)、合成特異性標(biāo)記引物60對,其中56對引物能擴(kuò)增出清晰條帶,有效引物的比例為93.3﹪。篩選出在一對抗感軟腐病親本間有多態(tài)性的標(biāo)記共計(jì)30個(gè),包括EST-PCR標(biāo)記11個(gè),EST-CAPS標(biāo)記19個(gè),且其中有9對引物與內(nèi)切酶的組合不唯一,其中共顯性標(biāo)記

3、16個(gè),顯性標(biāo)記14個(gè),多態(tài)性比例為50﹪。此外,對21條10bp的RAPD隨機(jī)引物進(jìn)行篩選,篩選出在同一抗感親本間表現(xiàn)出明顯多態(tài)性,且?guī)颓逦?、重?fù)性好的RAPD隨機(jī)引物共7條,RAPD標(biāo)記11個(gè)。在F<,2>群體的142個(gè)單株中,對上述41個(gè)標(biāo)記位點(diǎn)的基因型進(jìn)行了統(tǒng)計(jì),有31個(gè)標(biāo)記符合3:1或1:2:1的分離比例,頻率為75.6﹪。共有10個(gè)標(biāo)記表現(xiàn)偏分離,即不符合孟德爾分離比例(P<0.05),頻率為24.4﹪。有8個(gè)標(biāo)記表現(xiàn)嚴(yán)重

4、偏分離(P<0.01),頻率為19.5﹪。 本試驗(yàn)以大白菜軟腐病感病品種(A32-2)、抗病品種(A19-2)的F<,1>代自交產(chǎn)生的142個(gè)F。單株為作圖群體,利用Mapmaker 3.0軟件對前后篩選出的總計(jì)56個(gè)多態(tài)性分子標(biāo)記進(jìn)行遺傳定位,初步構(gòu)建了一張包含47個(gè)位點(diǎn)的分子標(biāo)記連鎖圖。其中包括16個(gè)EST-CAPS位點(diǎn),11個(gè)EST-SSR位點(diǎn),10個(gè)EST-RCR位點(diǎn),10個(gè)RAPD位點(diǎn),9個(gè)標(biāo)記表現(xiàn)出偏分離。該標(biāo)記遺傳

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