1、[目的] 彌漫大B細胞淋巴瘤(DLBCL)具有明顯的異質(zhì)性，病人之間生存情況差異顯著。依賴臨床參數(shù)的國際預后指數(shù)不能準確評價預后，從分子水平研究DLBCL生物學特性是揭示疾病本質(zhì)、正確評估預后的主要途徑。本研究擬通過寡核苷酸芯片、免疫組織化學以及單克隆抗體等技術，分析DLBCL基因表達譜，對其進行分子分型并篩選出亞型特異的靶基因；探討以免疫組織化學為基礎的分子分型與預后的關系；制備分子分型靶點CD10單克隆抗體，以供免疫組化使用。

2、 [方法] 采用Affymetrix寡核苷酸芯片檢測10例DLBCL的基因表達譜情況，根據(jù)71個基因?qū)?0例DLBCL進行分子分型，然后利用SAM分析篩選亞型特異的靶基因。采用免疫組織化學方法檢測57例DLBCL標本中CD10、Bcl-6和MUM1的表達情況，據(jù)此對DLBCL進行分子分型，并結合病人的生存情況分析不同亞型與預后的關系。通過載體構建、蛋白質(zhì)誘導表達、蛋白質(zhì)純化、細胞融合、克隆化等技術，篩選表達抗人CD10單克隆抗體的雜交

3、瘤細胞株，并制備和純化抗人CD10單克隆抗體。 [結果] 10例進行表達譜分析的DLBCL中，3例為GCB型，6例為ABC型，1例為Type3；篩選出94個亞型特異性靶基因，其中12個基因在ABC型表達上調(diào)而在GCB中表達下調(diào)，82個基因在GCB型表達上調(diào)而在ABC中表達下調(diào)。57例DLBCL預后分析結果：GCB型接受CHOP治療的患者與GCB型接受R-CHOP治療的患者完全緩解率(CR)、總生存率(OS)和無進展生存率(PFS

4、)均無明顯差別(CR: P=1.0000, OS: P=0.2933, PFS: P=0.1681)；GCB型接受CHOP治療的患者的完全緩解率、總生存率和無進展生存率均明顯優(yōu)于non-GCB型接受CHOP治療的患者(CR: P=0.0407, OS: P=0.0037, PFS: P=0.0017)；GCB型接受R-CHOP治療的患者與non-GCB型接受R-CHOP治療的患者完全緩解率、無進展生存率無明顯差別(CR: P=0.335

5、9, PFS: P=0.0891)，而在總生存率上non-GCB型接受R-CHOP治療的患者較低(OS: P=0.0326)。篩選出兩株穩(wěn)定分泌抗人CD10單克隆抗體的細胞株，制備并純化出IgG型抗人CD10單克隆抗體。 [結論] 利用基因芯片可以從全基因組水平研究DLBCL的基因表達情況，對DLBCL進行分子分型，其高通量的特點使得從成千上萬個基因中篩選具有特殊意義的靶基因成為可能。基于傳統(tǒng)的CHOP方案，GCB型的完全緩解率