1、目前，環(huán)境雌激素(EnvironmentalEstrogens，EEs)對人類和野生生物的有害影響引起了許多國際組織和世界各國政府的關(guān)注，成為本世紀(jì)環(huán)境科學(xué)的重大議題之一。本課題擬優(yōu)化重組酵母測評系統(tǒng)(Recombinantyeastestrogensystem，RYES)并將其用于檢測幾類環(huán)境物質(zhì)的雌激素活性，在此基礎(chǔ)上利用該方法和子宮增重試驗(UterusGrowthassay)，從體內(nèi)和體外兩個方面評價環(huán)境雌激素的聯(lián)合作用。

2、 重組酵母測評系統(tǒng)具有靈敏、簡便、快速、經(jīng)濟等優(yōu)點，應(yīng)用前景十分廣泛。目前該方法還處于繼續(xù)完善和發(fā)展階段，有必要對方法進行優(yōu)化研究。本課題采用己烯雌酚(Diethylstilbestrol，DES)和壬基酚(4-nonyphenol，4-NP)作為受試物，研究振蕩與非振蕩、酵母擴增時間、受試物作用時間(染毒時間)以及裂解方式等因素對雌激素活性的影響，優(yōu)化實驗條件，并檢測多氯聯(lián)苯(PCBs)、異黃酮(Genistein，GS)、擬除蟲菊

3、酯農(nóng)藥、葛根粗提取物等幾類環(huán)境物質(zhì)的雌激素活性，以驗證優(yōu)化后方法的穩(wěn)定性和實用性，促進其推廣應(yīng)用。結(jié)果顯示：振蕩條件不會影響雌激素活性，酵母擴增時間對雌激素活性有一定的影響，受試物作用時間和裂解方式對雌激素活性影響最大，運用該方法檢測環(huán)境雌激素的優(yōu)化組合為：孵箱擴增酵母30h，受試物作用時間30h，Y-PER裂解酵母細胞；優(yōu)化后的重組酵母測評系統(tǒng)可用于外源性化學(xué)物的初篩，在被檢測的環(huán)境物質(zhì)中，異黃酮和葛根粗提取物具有強雌激素活性，汽油燃

4、燒汽車尾氣具有弱雌激素活性，而其它受試物在本實驗條件下均未檢出雌激素活性。 在子宮增重試驗中，將雙酚A(BisphenolA，BPA)和己烯雌酚(Diethylstilbestrol，DES)以單獨和聯(lián)合的形式給予未成年SD雌性大鼠(21d)，通過觀察大鼠子宮濕重、子宮/體重比、子宮腔內(nèi)膜上皮高度、宮腔平滑肌厚度、宮腔腺體數(shù)量、陰道開口率和成熟卵泡數(shù)量來評價這兩種物質(zhì)的聯(lián)合雌激素效應(yīng)。結(jié)果顯示：將BPA和DES單獨給予未成年SD大

5、鼠后，它們均能使大鼠子宮增大，宮腔內(nèi)膜上皮高度和宮腔平滑肌厚度增加，宮腔腺體數(shù)量和成熟卵泡數(shù)量增加，表明BPA和DES均具有雌激素樣作用，且DES的雌激素活性遠遠大于BPA，至少為BPA雌激素活性的10000倍；將BPA和DES以不同劑量聯(lián)合給予大鼠后，各聯(lián)合組與相應(yīng)劑量下受試物單獨作用之和相比，其子宮濕重、子宮/體重比、宮腔上皮高度和平滑肌厚度等均無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，說明在本實驗條件下BPA和DES聯(lián)合后表現(xiàn)為相加作用。