1、木霉是土壤微生物區(qū)系的重要組成部分，在土壤中增加其含量能夠防治多種植物病害，是應(yīng)用非常廣泛的生物防治菌。分析土壤中木霉的遺傳以及功能多樣性，能夠?yàn)殚_(kāi)發(fā)多功能木霉資源，拓展木霉的應(yīng)用空間，有效地利用木霉防治植物病原菌，提供理論基礎(chǔ)，并可能發(fā)現(xiàn)能夠應(yīng)用于多功能菌劑開(kāi)發(fā)的木霉菌株。 本實(shí)驗(yàn)從山東省臨沂、聊城、壽光、章丘四個(gè)地區(qū)的西紅柿、黃瓜大棚，韭菜、白菜菜地，大蒜、大蔥種植區(qū)采取的120份土壤樣品中分離獲得木霉244株。 通

2、過(guò)對(duì)峙培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)對(duì)棉花棉花立枯絲核菌具有一定拮抗功能的有114株，其中拮抗作用較好的有19株；通過(guò)固體培養(yǎng)法檢測(cè)解磷、解鉀、固氮能力發(fā)現(xiàn)，244株木霉中有74株具有明顯解磷圈，且發(fā)現(xiàn)拮抗效果較好的19株解磷圈較大，未發(fā)現(xiàn)有明顯解鉀透明圈的菌株，所有菌株在固氮培養(yǎng)基上無(wú)生長(zhǎng)現(xiàn)象。 對(duì)19株拮抗效果較好且解磷圈較大的菌株進(jìn)行液體培養(yǎng)檢測(cè)解磷、解鉀能力，發(fā)現(xiàn)，在液體培養(yǎng)條件下，部分菌株未顯示出解磷能力，菌株T13-8(1.792μg

3、/mL)、T23(1.652μg/mL)顯示出較高的解磷能力；部分菌株在液體培養(yǎng)下顯示出一定的解鉀功能，菌株T47-4(20.585μg/mL)顯示出較高的解鉀能力。通過(guò)平板實(shí)驗(yàn)檢測(cè)此19個(gè)菌株植酸酶活性發(fā)現(xiàn)，能夠水解植酸鈣的有15株，其中包括高效解磷菌株T13-8、T23，高效解鉀菌株T47-4。 對(duì)以上19個(gè)菌株進(jìn)行了形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定，發(fā)現(xiàn)菌株T8-4、T9-1、T23、T25、T30-5、T31-3、T38-5、T4

4、7-4、T35-1為T(mén)richoderma longibrachiatum；菌株T80-2、T38-6、T13-8、T44-1、T57、T62-2、T34、T17為T(mén)richodermaharzianum；菌株T61-2為T(mén)richoderma virens：菌株T18-1為T(mén)richoderma citrinoviride。依據(jù)ITS序列進(jìn)行的系統(tǒng)發(fā)育分析結(jié)果支持此19個(gè)木霉菌株的鑒定結(jié)果。 研究土壤木霉多樣性時(shí)，將來(lái)自相同地

5、區(qū)同種蔬菜作物的土樣混合為一份土樣，120份共混成13份混合土壤樣品，設(shè)計(jì)木霉ITS區(qū)特異保守序列擴(kuò)增引物，利用PCR-DGGE技術(shù)對(duì)土壤木霉的多樣性進(jìn)行了分析。發(fā)現(xiàn)，臨沂地區(qū)木霉多樣性較高，其次為聊城、壽光、章丘；同一地區(qū)，不同蔬菜作物土壤中，木霉種類(lèi)具有相似性，不同地區(qū)之間也有相似種；木霉多樣性高的地區(qū)土傳病害的發(fā)生相對(duì)較少。為了進(jìn)一步對(duì)PCR-DGGE技術(shù)用于土壤木霉多樣性分析的可行性提供理論支持，本實(shí)驗(yàn)先后通過(guò)DGGE技術(shù)對(duì)19