1、乙肝已成為嚴重危害人類健康的重點疾病，每年約50萬人死于由乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus，HBV)感染引起的肝硬化、肝癌。HBV研究一直面臨缺少合適的動物模型，阻礙了其致病機理、藥物篩選、疫苗開發(fā)等研究的進程。黑猩猩能有效感染HBV，因數(shù)量稀少、涉及倫理學等難以作為實驗動物用于肝炎研究。樹鼩(Tupaiabelangei)是一種與靈長類親緣關系較近的哺乳動物。因其體積小易于實驗室飼養(yǎng)，對多種人類病毒如單純皰疹、輪狀病毒、H

2、CV、HBV易感，被認為是研究人類感染性疾病如HBV的一種理想的動物模型。 如何有效地清除HBV和治療慢性乙型肝炎感染仍然是醫(yī)學界一個重要課題。打破機體對HBV的免疫耐受，激發(fā)病毒特異的免疫應答是清除體內(nèi)HBV從而治愈乙肝的根本發(fā)展方向。研究發(fā)現(xiàn)CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞(Tregs)在HBV感染中可抑制病毒特異性CD8+效應T細胞功能，在HBV免疫耐受中起重要作用。白介素-2受體alpha鏈(CD25)是CD4+CD25+

3、Tregs重要的表面分子和標志。利用樹鼩建立慢性HBV感染模型，以CD4+CD25+Tregs的CD25為靶點，通過抗體抑制CD4+CD25+Tregs的功能，打破免疫耐受，可能為慢性HBV的發(fā)病機理、治療和防治提供新的研究平臺。 為了充分利用樹鼩作為慢性HBV感染的動物模型，我們以樹鼩脾臟RNA為模板，對樹鼩白介素-2受體基因alpha鏈(tsCD25)進行了RT-PCR，獲得了一個816bp的開放閱讀框。TsCD25cDNA

4、編碼一個由271個氨基酸組成的分子量為30.9kD的蛋白多肽。預測的tsCD25包含2個Sushi結構域、2個N-糖基化位點和多個O-糖基化位點。 我們分析了tsCD25與其它物種CD25分子的系統(tǒng)發(fā)生關系。在已知的哺乳動物分子中，tsCD25與豬、馬、牛的一致性較低分別是59.5％、56.9％和52.4％，其和嚙齒類CD25分子的一致性最低分別是小鼠57.4％、大鼠46.4％，其和靈長類CD25的同源性最高為65.3％-66.

5、4％。 我們分析了tsCD25與人CD25的氨基酸序列。tsCD25與人CD25的分子結構非常相似。在蛋白質(zhì)分子的N端都含有長約21個氨基酸的信號肽，胞外區(qū)形成特征性的Sushi結構域。此外，含有19個氨基酸的跨膜區(qū)以及在蛋白質(zhì)的C端都含有約13個氨基酸的胞內(nèi)區(qū)。 RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)，tsCD25mRNA分布于樹鼩的外周血、脾臟和肺。我們比較幾種有絲分裂原發(fā)現(xiàn)PMA(豆蔻酰佛波醇乙酯)加ionomycin(鈣離子載體)

6、對樹鼩淋巴細胞的活化效果優(yōu)于PHA(植物凝集素)，ConA(刀豆蛋白A)。RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)，tsCD25mRNA受PMA和ionomycin刺激的調(diào)節(jié)。此外，還對tsCD122和tsCD132mRNA的組織分布和活化后淋巴細胞上的表達情況進行分析。這兩個IL-2受體亞單位在肺、脾臟、外周血中也是可測的。除這些組織外，tsCD132mRNA也分布于在樹鼩的肝臟、腎臟和骨髓中。TsCD122和tsCD132mRNA同樣受PMA和iono