1、目的觀察"雙固一通"針法對糖尿病大鼠的治療作用及對其神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò)的調(diào)控作用,尋求其阻止糖尿病及其并發(fā)癥發(fā)展的途徑,并探討其可能的作用機制.方法1."雙固一通"針法簡介:來源于導師王華教授的"雙固一通"針灸治療學思想,針灸防治疾病注重治病求本,以正氣為本,固護先天和后天是其基礎(chǔ)和關(guān)鍵;通過"治"來達到"防"的目的,"治"是積極的、主動的"防".雙固,即固護人體先天之本和后天之本,選用具有固護先天(元氣)的關(guān)元(或腎俞)和固護后天(胃

2、氣)的足三里(或三陰交)為主穴,固定使用;"一通"即疏通經(jīng)脈,通瀉病邪,用穴為阿是穴或隨證取穴.本課題所采用的"雙固一通"針法,即選取固護正氣的足三里和關(guān)元為主穴,配用治療糖尿病的經(jīng)驗穴胰俞進行針刺.2.實驗方法:180-220 gWi star大鼠93只,15只為正常對照(A組),另78只行鏈脲左菌素腹腔注射造模,電解損毀PVN.造模成功的糖尿病大鼠隨機分為7組:模型對照組(B組,n=15),"胰俞"針刺組(C組,n=15),"雙固一

3、通"針刺組(D組,n=15),常規(guī)取穴針刺組(E組,n=15),PVN(paraventricular nucleus,室旁核)損毀組(C'組,n=6),PVN損毀并"雙固一通"針刺組(D'組,n=6),假損毀組(E'組,n=6).對C、D、E和D'組進行2個療程的治療,每個療程6天,療程間隔2天.用血糖儀檢測血糖;運用流式細胞儀檢測全血T細胞亞群(CD4+/CD3+、CD8+/CD3+);運用放射免疫分析法檢測各組血漿胰島素、血清IL

4、-6和血漿Leptin(瘦素)水平;免疫組織化學SABC法檢測下丘腦Leptin受體、NPY(ne uropepti de Y,神經(jīng)肽Y)表達;原位雜交法檢測下丘腦Leptin受體mRNA和NPYmRN A表達;運用圖象分析系統(tǒng)進行下丘腦Leptin受體、NPY及其相應(yīng)m RNA免疫陽性物檢測.結(jié)論1."雙固一通"針法對糖尿病大鼠的降糖作用確切,其作用與血漿胰島素無關(guān);可使其降低的CD4+T細胞比例升高,而使上升的CD8+T細胞比例降低

5、,通過調(diào)節(jié)CD4+T/CD8+T比值而對機體免疫系統(tǒng)發(fā)揮影響,從而調(diào)控機體神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò)是"雙固一通"針法對該網(wǎng)絡(luò)發(fā)揮作用的重要環(huán)節(jié);2."雙固一通"針法使糖尿病大鼠升高的炎癥細胞因了IL-6 降低的同時,使糖尿病大鼠降低的脂源性激素Leptin水平降低,能夠抑制糖尿病炎癥反應(yīng),改善胰島素抵抗,保護胰島β細胞的功能;3."雙固一通"針法能顯著升高糖尿病大鼠下丘腦低水平的LeptinR及其基因的表達,顯著降低糖尿病大鼠下丘腦NPY及其

6、基因的表達,有效發(fā)揮其調(diào)節(jié)能量代謝、改善胰島素敏感性和神經(jīng)內(nèi)分泌的作用,這可能是"雙固一通"針法調(diào)控糖尿病大鼠神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò)的重要中樞機制之一.4."雙固一通"針法對糖尿病代謝和神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò)的調(diào)控部分是通過PVN實現(xiàn)的.5."雙固一通"針法對神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò)具有明顯的調(diào)控作用,從多途徑阻止糖尿病及其并發(fā)癥的發(fā)展;這種調(diào)控作用是以該網(wǎng)絡(luò)的分子和受體間的信息交流為基礎(chǔ)的,體現(xiàn)了針刺調(diào)節(jié)作用的整體性.6.這些為"雙固一通"針法運用