1、山柰酚是一種普遍存在于中草藥和日常植物類食品中的黃酮醇，具有抗炎、抗腫瘤、預(yù)防心血管疾病等作用。本文對山柰酚的體外抗結(jié)腸癌活性進(jìn)行了研究，主要探討了山柰酚在人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞中誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的機(jī)制。 實驗結(jié)果表明，山柰酚對人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞具有顯著的細(xì)胞毒活性，對細(xì)胞生長的抑制作用呈現(xiàn)明顯的時間和劑量依賴性。形態(tài)學(xué)觀察、流式細(xì)胞術(shù)DNA含量分析以及PARP和半胱天冬蛋白酶酶解檢測都證實了山柰酚誘導(dǎo)人結(jié)腸癌HCT116細(xì)

2、胞死亡的機(jī)制主要為促進(jìn)細(xì)胞程序性死亡。山柰酚作用于人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞后，半胱天冬蛋白酶-3和半胱天冬蛋白酶-9的酶原被激活，而半胱天冬蛋白酶-8則未發(fā)生酶切。山柰酚給藥后引發(fā)腫瘤抑制因子p53表達(dá)量增加，磷酸化水平也隨之呈現(xiàn)劑量依賴性地遞增，說明山柰酚在人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞內(nèi)活化了p53信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，在p53基因缺失的HCT116細(xì)胞中，山柰酚的細(xì)胞毒作用被大大降低。表明p53信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對山柰酚的細(xì)胞毒作用發(fā)揮至關(guān)重要的影響

3、。 山柰酚對外源性凋亡途徑內(nèi)的主要分子Fas，DR4，DR5的表達(dá)沒有影響。而在內(nèi)源性凋亡通路方面，山柰酚使Bcl-2家族中的促凋亡蛋白Bax表達(dá)增加，抑制凋亡的蛋白Bcl-2的表達(dá)則被降低，最終導(dǎo)致Bcl-2對Bax的比例下調(diào)。Bcl-2家族中的唯BH3域蛋白PUMA受山柰酚影響而上調(diào)，并與抗凋亡蛋白Bcl-xL結(jié)合，介導(dǎo)p53凋亡信號。 對絲裂原激活的蛋白激酶MAPK通路的研究顯示，山柰酚對JNK的磷酸化水平?jīng)]有影響

4、，但增加了p38的磷酸化水平。p38抑制劑可以降低山柰酚的細(xì)胞毒活性，表明p38通路對山柰酚抗癌活性有一定貢獻(xiàn)。對DNA損傷應(yīng)答通路的研究表明，山柰酚激活了ATM-p53通路，并活化了H2AX等參與DNA損傷修復(fù)的重要分子。ATM抑制劑導(dǎo)致了山柰酚活化p53的能力和細(xì)胞毒作用的顯著降低。山柰酚還對表皮生長因子受體EGFR的活化產(chǎn)生了抑制作用，但并未對其下游的ERK1/2通路和AKT通路產(chǎn)生抑制，并增強(qiáng)了AKT的磷酸化水平。這可能是由于H