1、本文為了解決魚粉供應(yīng)緊張，找到更好的海水養(yǎng)殖動物飼料，進行了高蛋白海洋酵母的篩選，并通過分析其氨基酸組成，核酸含量組成，脂肪酸組成等，找出適合水產(chǎn)養(yǎng)殖動物的高蛋白海洋酵母作為單細胞蛋白飼料。 采用凱氏定氮法測定了327株海洋酵母的粗蛋白含量，從中選擇了8株高蛋白海洋酵母作為單細胞蛋白源的候選，這8株菌的生物量(g/1)及蛋白質(zhì)含量(w/w)分別為：YA03a：2.1，57.4；W6b：3.5，49.8；N3c：7.1，42.5：

2、N11b：8.1，40.41.G7a：5.3，41.4；N17：9.3，39.2；G7b：2.9，33.5：4＃2：7.9，30.4。又通過生理生化和分子生物學(xué)方法對這8株高蛋白海洋酵母進行了多樣性研究，經(jīng)過鑒定發(fā)現(xiàn)這8株菌屬于6個屬，多樣性很豐富。這8株菌的最后鑒定結(jié)果如下：W6b屬于拉考夫梅奇氏酵母(Metschnikowa reukaufii)，G7a屬于金黃色隱球酵母(Cryptococus aureus)，G7b和4＃2屬于普

3、魯蘭類酵母(Aureobasidiumpullulans)，N3c和N11b屬于解脂亞羅酵母(Yarrowia lipolytica)，N17屬于熱帶假絲酵母(Candida tropicalis)，YA03a屬于有孢漢遜酵母(Hanseniasporauvarum)，目前還沒有查到關(guān)于高蛋白海洋酵母多樣性研究的資料。隨后我們又分析了這8株菌的營養(yǎng)組分，包括核酸含量測定、脂肪酸組分分析、以及氨基酸組分分析。結(jié)果表明這8株菌的核酸含量在2

4、.3-7.85/0之間，均小于11％，符合作為單細胞蛋白的核酸標(biāo)準(zhǔn)。這8株海洋酵母的脂肪酸組分除了YA03a是以C<,16:1>為主外，其它7株菌的脂肪酸組分都以C<,18：0>和C<,18：1>為主，它們均缺乏海洋動物生長必需的兩種多不飽和脂肪酸C<,20:5>和C<,22：6>，這些海洋酵母作為單細胞蛋白使用時需要添加富含這兩種多不飽和脂肪酸的藻類。這8株海洋酵母均含有高水平的必需氨基酸組分，尤其是海洋動物生長所必需的賴氨酸和亮氨酸

5、含量很高。通過多樣性分析以及氨基酸組分分析我們發(fā)現(xiàn)高蛋白海洋酵母G7a蛋白質(zhì)含量高，核酸含量低，碳源利用范圍廣，且具有菊糖酶活性，因此我們選擇菌株G7a作為下一步研究對象，對它的培養(yǎng)基組分及培養(yǎng)條件進行了優(yōu)化，優(yōu)化結(jié)果如下：最佳培養(yǎng)基組分為：6.0％的菊芋汁+4.0％的豆餅粉水解液，最佳培養(yǎng)條件為：28℃，pH5。并通過21發(fā)酵罐試驗測定了最佳培養(yǎng)基組分和培養(yǎng)條件下的生物量為10.1g/l，蛋白質(zhì)含量為53.0％，最佳培養(yǎng)時間為56h，

6、且此時培養(yǎng)基中只剩下0.051％(w/v)的還原糖和0.072％(w/v)的總糖，菌株G7a用掉了培養(yǎng)基中96％的糖，糖的利用率很高。此時，G7a的核酸含量為2.1％(w/w)，細胞含有大量的C<,16：0>(19.0％)，C<,18:0>(46.3％)和C<,18：1>(33.3％)脂肪酸，必需氨基酸水平很高，尤其是賴氨酸(12.6％)和亮氨酸(9.1％)，G7a細胞還有對海洋動物生長很重要的Vc(2.2mg/100g)。因為酵母細胞

7、的細胞壁厚，海洋動物的腸道短且沒有消化酵母細胞壁的酶，若想提高該單細胞蛋白的生物利用率，必須在用作單細胞蛋白之前使它們的蛋白質(zhì)盡量的釋放出來，因此我們又對G7a 進行了溫度敏感自溶突變株的研究。按照Cabib等(1975)以及R.Gonzalez等(2003)的方法選擇了一株理想的溫度敏感自溶突變株G47，獲得該自溶突變株最佳自溶時間為30min，每毫升菌體(10<'8>cells/ml)所釋放出來的蛋白質(zhì)為2.89mg，通過計算得出自