1、[目的]： 探討人參皂苷Re對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)肥胖(DIO)大鼠胰島素敏感性和血脂代謝的影響及其作用機(jī)制。 [材料與方法]： Wistar雄性大鼠(220±10g)81只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組(NC)、高脂飲食對(duì)照組(HF)和高脂飲食Re治療組(HF-Re)。適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，分別予以普通飲食或高脂飲食喂養(yǎng)兩周，然后予以Re20mg/kg或等體積溶媒腹腔注射，每日兩次。兩周后，隨機(jī)從各組取12只大鼠進(jìn)行左側(cè)頸動(dòng)脈及右側(cè)

2、頸靜脈置管，術(shù)后一周行清醒狀態(tài)下高胰島素.正葡萄糖鉗夾(HEC)實(shí)驗(yàn)。其余大鼠繼續(xù)給予Re或溶媒處理，3周后空腹采血，用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法測(cè)定血漿白細(xì)胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-αTNF-α)、脂聯(lián)素(adiponcetin)水平，用全自動(dòng)生化儀測(cè)血糖、血脂濃度。同時(shí)留取肝臟、皮下(Sub)及附睪內(nèi)臟脂肪組織(Epi)，并記錄體重及Sub、Epi重量。石蠟包埋和蘇木素伊紅(HE)染色后，觀察各組大鼠Epi脂肪細(xì)胞

3、形態(tài)。用Real-timePCR和Westernblot方法研究Epi和肝臟組織炎癥因子及相關(guān)信號(hào)通路基因和蛋白水平的變化。利用HepG2細(xì)胞模型，通過Westernblot和Real-timePCR技術(shù)，研究Re對(duì)脂代謝相關(guān)信號(hào)蛋白的影響。 [結(jié)果]： (1)成功建立了穩(wěn)定的清醒狀態(tài)下大小鼠HEC技術(shù)；(2)DIO大鼠的體重顯著高于NC喂養(yǎng)組，Re可抑制DIO大鼠體重增加； (3)在高胰島素.正葡萄糖鉗夾過程中

4、，HF和HF-Re組大鼠的葡萄糖輸注速率(GIR)顯著低于NC組，HF-Re組的GIR顯著高于HF組； (4)DIO大鼠的Sub、Zpi重量及其占相應(yīng)動(dòng)物體重的比例顯著高于NC組，HF-Re組的Sub、Epi含量顯著低于HF組； (5)NC大鼠的Epi脂肪細(xì)胞較小，胞內(nèi)脂肪含量較少，HF組大鼠Epi的脂肪細(xì)胞明顯變大，胞內(nèi)脂肪含量增多，HF-Re組大鼠的Epi脂肪細(xì)胞較HF組變小，胞內(nèi)脂肪含量減少； (6)NC、

5、HF和HF-Re各組間血漿脂聯(lián)素、IL-6、TNF-α水平無顯著差異，但HF組Epi的IL-6、TNF-α和瘦素(leptin)mRNA表達(dá)水平升高，而HF-Re組的Epi的IL-6、TNF-α和瘦素mRNA表達(dá)水平顯著低于HF組，與NC組無顯著差異。HF組Epi脂聯(lián)素mRNA水平顯著低于NC組，HF-Re組的Epi脂聯(lián)素mRNA水平雖高于HF組，但低于NC組； (7)HF組大鼠Epi的IκBα和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)磷

6、酸化水平顯著低于NC組，HF-Re組大鼠Epi中IκBα及磷酸化AMPK水平顯著高于HF組； (8)HF組大鼠Epi的c-jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化水平顯著高于NC組，而HF-Re組大鼠Epi的JNK磷酸化水平顯著低于HF組； (9)HF組大鼠Epi中AS160水平顯著低于NC組，但HF-Re組的AS160水平顯著高于HF組大鼠； (10)HF組和HF-Re組大鼠血漿甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)和低

7、密度脂蛋白(LDL)水平顯著高于NC大鼠，而HF-Re組的血漿TG、TC和LDL水平顯著低于HF組； (11)HF組大鼠肝臟磷酸化胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK)顯著低于NC組，而HF-Re組的肝臟ERK磷酸化水平高于HF組。Re也可升高HepG2細(xì)胞的ERK和AMPK磷酸化水平，并能顯著升高HepG2細(xì)胞LDL受體(LDLR)和過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)mRNA水平。 [結(jié)論]： 1、建立了穩(wěn)定的清

8、醒狀態(tài)下大、小鼠高胰島素-正葡萄糖鉗夾技術(shù)平臺(tái)。 2、DIO大鼠的胰島素敏感性低于NC組大鼠，人參皂苷Re可顯著改善DIO大鼠的胰島素敏感性。Re可能通過以下機(jī)制改善DIO大鼠胰島素敏感性：抑制DIO大鼠體重增加，減少其皮下及內(nèi)臟脂肪聚集，使其內(nèi)臟脂肪細(xì)胞變小、胞內(nèi)脂肪含量減少；激活DIO大鼠內(nèi)臟脂肪組織的胰島素信號(hào)通路中與GLUT4轉(zhuǎn)位密切相關(guān)的重要蛋白-AS160，進(jìn)而促進(jìn)脂肪組織對(duì)葡萄糖的利用；抑制內(nèi)臟脂肪組織JNK磷酸化