1、乳房炎是奶牛的一種常見多發(fā)病，是奶牛業(yè)生產(chǎn)中花費最多的疾病之一。乳房炎的治療主要采用抗生素和中草藥治療，由于抗生素的殘留及耐藥性問題，中草藥治療乳腺炎已成為國內(nèi)外研究的熱點。該研究根據(jù)奶牛乳房炎致病菌的特點，選用三角風、紫菀、威靈仙等5味藥進行單方有效成分和體外抑菌探索，開發(fā)出純中藥制劑復方三角風注射液，現(xiàn)將研究結果報道如下： 1.本文首次報道了三角風的化學成分 本試驗根據(jù)試管預試法和圓形濾紙層析法的特征性顯色反應、沉淀

2、反應和色譜結果分析.結果表明：三角風化學成分主要有皂苷、有機酸、生物堿、鞣質、酚性成分、糖類等。 2.本文首次報道了三角風有效成分和生物堿的提取與體外抑菌結果 該試驗采用經(jīng)典的醇類溶劑提取法。從300g三角風生藥中提取出總生物堿0.8453g，得率為0.28％。抑菌結果表明：三角風乙醇浸膏水溶液和三角風生物堿對5種獸醫(yī)臨床常見病原微生物均有較強的抑菌作用。特別是總生物堿對金色葡萄球菌、鏈球菌最敏感。 3.對三角風

3、的有效成分采用系統(tǒng)溶劑法進行了分級分離研究，并對分離出來韻每一級化合物進行了體外抑菌試驗和得率測定 用系統(tǒng)溶劑法對三角風乙醇提取物的水溶液進行萃取分離，萃取物的得率為：正丁醇萃取部分得率最高(2.04％)>剩余水溶液部分(1.20％)>乙酸乙酯萃取部分(0.20％)>氯仿萃取部分(0.13％)>石油醚萃取部分(0.04％)；萃取物的抑菌結果：除剩余水溶液部分無抑菌作用外，其余4部分都一定的抑菌效果，正丁醇萃取部分抑菌效果最好，特

4、別對巴氏桿菌和鏈球菌最為敏感。 4.建立了分離和鑒定三角風皂苷類化合物的TLC、HPLC試驗條件方法 根據(jù)有皂苷的物理化學性質和有機物的極性特點，利用展開劑的常規(guī)方法與Glajch三角形法相結合，篩選出分離總皂苷的薄層層析展開劑體系。篩選結果為：甲醇∶正丁醇∶氯仿(16∶16∶67，V/V)，其Rf值分別為0.30、0.38、051、0.62。 對HPLC洗脫劑、洗脫流速、洗脫柱溫度、進樣量、波長等條件進行逐步篩

5、選，篩選結果為：HPLC條件：流動相：乙腈—水，柱溫30℃，流動相流速為1.0ml/min，進樣量：10ul，波長：214nm. 5.對紫菀進行了化學成分鑒定、有效成分提取及體外抑菌研究 本試驗根據(jù)試管預試法和圓形濾紙層析法特征性顯色反應、沉淀反應和色譜結果表明：紫菀化學成分主要含有生物堿、有機酸、黃酮類、多糖、酚類、鞣質、黃酮類、植物三萜和揮發(fā)油等。與有關紫菀化學成分分析文獻報道比較，與本試驗的研究結果基本相似，但我們

6、的結果還檢驗出了多糖和生物堿，且生物堿的含量達0.1523％；說明紫菀的化學成分存在地方差異，其生物堿的有無及含量高低受生長環(huán)境、季節(jié)等多因素的影響。 本文首次用紫菀乙醇提取液和生物堿對獸醫(yī)臨床常見的病原微生物進行了抑菌研究，結果表明：紫菀對沙門氏菌、巴氏桿菌、鏈球菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌都具有較好的抑菌和殺菌作用。 6.復方三角風注射液生產(chǎn)工藝研究 根據(jù)酸水提取法、超聲提取法、水提取法的體外抑菌效果和制劑的

7、穩(wěn)定性進行篩選出酸水提取乙醇沉淀法為復方三角風注射液生產(chǎn)工藝，用酸水提取乙醇沉淀制備的復方三角風注射液為棕紅色澄清透明液體，PH值為6.0±0.3，每1ml注射劑相當于生藥2g，規(guī)格10ml/支、5ml/支。 7.復方三角風注射液安全性評價 對復方三角風注射液制劑的穩(wěn)定性、熱原、溶血性、過敏源、刺激性進行檢驗以及急性毒性試驗評價都符合《中華人民共和國獸藥典》(2005年版)注射液的規(guī)定，適合肌肉注射給藥。 8.復

8、方三角風注射液的臨床療效研究 為了便于確定臨床的使用劑量和使用方法，對不同時間、不同地點患乳腺炎120頭奶牛進行隨機分為4組：高劑量(0.1ml/kg.bw)、中劑量組(0.05ml/kg.bw)、低劑量組(0.025ml/kg.bw)和對照組(注射10ml/頭的生理鹽水)，給藥組治療有效率結果為96.6％、86.6％，53.3％。根據(jù)臨床治療結果、給藥劑量綜合考慮，0.05ml.kg.bw適合用于作復方三角風注射液的臨床治療使