1、為了探討骨碎補及其主要有效成分柚皮苷對機體骨骼代謝的影響，本研究采取二次酶消化法，以新生24 h大鼠的顱骨為材料分離培養(yǎng)成骨細胞，經形態(tài)觀察(瑞氏染色)、ALP染色和鈣化結節(jié)(茜素紅、Von Kossa)染色鑒定后，進行傳代培養(yǎng)。以細胞培養(yǎng)液中不加藥物的試驗組作為空白對照，采用MTT法、PNPP法及酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)分別檢測不同濃度的骨碎補水提液(10mg/mL、1 mg/mL、1.0×10<'-1>mg/mL、1.0×1

2、0<'-2>mg/mL、1.0×10<'-3>mg/mL、1.0×10<'-4>mg/mL、1.0×10<'-5>mg/mL)及柚皮苷(1.0×10<'-4>mol/L、1.0×10<'-5>mol/L、1.0×10<'-6>mol/L、1.0×10<'-7>mol/L)對體外培養(yǎng)的大鼠第三代成骨細胞增殖、分化功能及細胞分泌IGF-I水平的影響。結果表明： 1．骨碎補水提液及柚皮苷分別作用于體外培養(yǎng)的大鼠成骨細胞48 h和72

3、h后，二者能明顯促進成骨細胞的增殖。作用48 h，較高濃度的骨碎補水提液組和柚皮苷組對成骨細胞有較強的促增殖作用；作用72 h，骨碎補水提液和柚皮苷各濃度組均能顯著促進成骨細胞增殖，其作用比48 h佳。 2．骨碎補水提液和柚皮苷作用于體外培養(yǎng)的大鼠成骨細胞48 h后，與對照組相比，中濃度(1.0×10<'-3>mg/mL、1.0×10<'-2>mg/mL)的骨碎補水提液能夠使成骨細胞ALP活性顯著升高(P<0.05)，從而促進成