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文檔簡介
1、目的:探討致敏樹突狀細(xì)胞(Dendritic cells,DC)聯(lián)合細(xì)胞毒性T細(xì)胞(cytotoxicT lymphocytes,CTL)對惡性膠質(zhì)瘤的治療作用。
方法:分離培養(yǎng)SD大鼠骨髓來源的DC并用C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞凍融抗原致敏,通過流式細(xì)胞儀檢測大鼠DC特異性標(biāo)志OX62的表達(dá)情況;培養(yǎng)大鼠脾臟來源的T淋巴細(xì)胞,用負(fù)載C6細(xì)胞抗原的DC誘導(dǎo)T細(xì)胞活化為CTL;用CCK-8法檢測致敏DC對T淋巴細(xì)胞增殖的刺激能力以及CTL對
2、C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞的體外殺傷能力。制作SD大鼠顱內(nèi)C6膠質(zhì)瘤模型并分為4組:致敏DC治療組、CTL治療組、致敏DC聯(lián)合CTL治療組和對照組。從建模后第三天開始對大鼠進(jìn)行免疫治療,之后每周加強(qiáng)注射一次,共治療4次。治療過程中對荷瘤鼠的生存質(zhì)量進(jìn)行跟蹤評價,第21天行MRI檢查計算各組大鼠腫瘤的體積,分析各組大鼠的生存時間和存活率,并取腦組織做病理學(xué)檢查了解各組治療方式對腫瘤細(xì)胞生長情況的影響。對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析以比較各組件的療效是否有差異,分
3、析聯(lián)合致敏DC和CTL治療惡性膠質(zhì)瘤的效果。
結(jié)果:培養(yǎng)的DC經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測OX62陽性率在85%以上;致敏的DC能夠有效刺激T淋巴細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)CTL的分化,獲得的CTL對C6細(xì)胞具有顯著的殺傷的作用;聯(lián)合致敏的DC和CTL治療的膠質(zhì)瘤大鼠,MRI測得顱內(nèi)腫瘤體積明顯小于DC治療組(P<0.01)和CTL治療組(P<0.05),中位生存期明顯長于單純CTL治療組大鼠(P<0.01)。病理檢查結(jié)果:肉眼可見DC聯(lián)合CTL治療
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