1、分類(lèi)號(hào)R7433中國(guó)鏨升夫單位代碼：10159學(xué)號(hào)：200050016拳碩士學(xué)位論文(具有研究生畢業(yè)同等學(xué)力申請(qǐng)學(xué)位人員)題目：bFGF在轉(zhuǎn)染bcl一2基因治療大鼠局灶性腦缺血的表達(dá)TheexpressionofbFGFwithbcl一2geneinjectedaftertheMCA0for2hoursinrat申請(qǐng)人：卜曉霞推薦人：何志義學(xué)科專(zhuān)業(yè)：塑絲疸堂論文課題起止時(shí)間：2004年8月一2005年8月論文完成時(shí)間：2005年8月bF

2、GF在轉(zhuǎn)染bcl一2基因治療大鼠局灶性腦缺血的表達(dá)目的研究bFGF在轉(zhuǎn)染bcl一2基因治療大鼠局灶性腦缺血的表達(dá)，探討轉(zhuǎn)染bcl一2基因治療大鼠局灶性腦缺血的作用，及其作用機(jī)制是否與bFGF蛋白的表達(dá)有關(guān)。方法取99只體重280一3009的wistar大鼠，隨機(jī)分配到3組中，分別為MCA0組(對(duì)照組n=33)，頸內(nèi)動(dòng)脈注射空質(zhì)粒組(質(zhì)粒對(duì)照組n=33)，頸內(nèi)動(dòng)脈注射質(zhì)粒pD【SN介導(dǎo)bcl一2基因組(bcl一2組n=33)，每組再隨機(jī)分

3、成為缺血再灌注24h、48h和72h3個(gè)亞組。采用改良L0nga線栓法制備大鼠左側(cè)大腦中動(dòng)脈缺血2小時(shí)模型，2小時(shí)撤出漁線，實(shí)現(xiàn)再灌注。大鼠右側(cè)肢體活動(dòng)障礙，表示模型成功：缺血再灌注后3小時(shí)向左頸內(nèi)動(dòng)脈分別注射空質(zhì)粒pⅨsN、質(zhì)粒重組體pⅨsN—bcl一2。注射成功的大鼠模型在缺血再灌注24h、48h和72h做如下測(cè)定并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。l腦梗死體積測(cè)定：測(cè)定梗死體積的大鼠，直接斷頭、取腦，將大腦每2mm切片，采用TTC(紅四氮唑)染色，4

4、％多聚甲醛固定，梗死部分呈白色，正常部分呈紅色。再應(yīng)用顯微圖像分析系統(tǒng)計(jì)算腦缺血再灌注24h、48h、72h后的梗死體積。2免疫組化測(cè)定：實(shí)驗(yàn)大鼠用lO％水合氯醛腹腔注射麻醉(35彬k)，然后以生理鹽水及4％多聚甲醛經(jīng)左心窒進(jìn)行心臟灌注，固定，石蠟包埋，連續(xù)冠狀切片(厚6斗m)，應(yīng)用SABC法’bcl一2免疫組化測(cè)定一抗為小鼠抗人IgG，bFGF免疫組化測(cè)定一抗為小鼠抗bFGF蛋白前體，二抗為生物素化山羊抗小鼠IgG，DAB顯色劑，常規(guī)