抗血管生成治療膠質(zhì)瘤的實驗研究.pdf_第1頁
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1、絲型鯊! 絲型:型絲————一 論文一中文摘要人腦膠質(zhì)瘤中血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)與腫瘤血管生成及細(xì)胞增殖活性的關(guān)系博士研究生:王成偉博士生導(dǎo)師:張慶林教授f 膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的原發(fā)性腫瘤,占全部顱內(nèi)腫瘤的4 4 .6 b %,即使采用以手術(shù)治療為主、輔以放療和化療的綜合治療手段,療效仍不理想,中位生存期僅為5 2 周,因此膠質(zhì)瘤被認(rèn)為是神經(jīng)外科領(lǐng)域待解決的難題,探討新的治療方法具有重要意義。近幾年研究發(fā)現(xiàn),實體性腫瘤的生長與轉(zhuǎn)移

2、依賴于血管生成。血管內(nèi)皮生長因子( v a s c u l a r e n d o t h e i i a l g r o w t hf a c t o r ,V E G F ) 在一些惡性腫瘤中高度表達(dá),V E G F 與腫瘤血管生成密切相關(guān),膠質(zhì)瘤是富含血管的腫瘤之一,探討V E G F 與膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)系十分重要廣~為探討V E G F 在入腦膠質(zhì)瘤中表達(dá)及其與腫瘤微血管密度( m i c r o v e s s e l d

3、e n s i t y ,^ I 、r D ) 和細(xì)胞增殖活性的關(guān)系,以便為抗血管生成治療膠質(zhì)瘤提供理論依據(jù),我們應(yīng)用S A B C 免疫組化技術(shù)檢測6 7例人腦膠質(zhì)瘤、8 例正常腦組織中V E G F 表達(dá),用C D 3 1 免疫組化染色檢測膠質(zhì)瘤中M V D ,應(yīng)用增殖細(xì)胞核抗原標(biāo)記指數(shù)( P C N A l a b e l in gi n d e x ,P C N A L I ) 評價膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖活性。并分析V E G F 、I

4、 d V D 、P C N AL I 與膠質(zhì)瘤分化程度、復(fù)發(fā)及預(yù)后的關(guān)系,探討V E G F 與M V D 、P C N A L I的相關(guān)關(guān)系。f 結(jié)果發(fā)現(xiàn),V E G F 蛋白在各級膠質(zhì)瘤中均有表達(dá),陽性率為8 3 .6 %,而正常腦組織中無V E G F 陽性表達(dá)。膠質(zhì)瘤I ~I(xiàn) I 級、I I I 級、I v 級中V E G F 陽性表達(dá)率分別為5 6 .5 %、9 5 .5 %和i 0 0 %,不同病理級別的膠質(zhì)瘤中V E G

5、F 表達(dá)差異有顯著性( F < 0 .0 0 5 ) ,惡性度越高,V E G F 陽性率m 東欠學(xué)搏t .學(xué)位論史·中史摘整論文二摘要a n g i o s t a t i n 基因?qū) 6 膠質(zhì)瘤體外生長的影響博士研究生:博士生導(dǎo)師:王成偉張慶林教授人腦膠質(zhì)瘤是富含血管的腫瘤之一,腫瘤的無限制侵襲性生長必須依賴于持續(xù)和廣泛的新生血管生成,如果能夠抑制或破壞這些新生血管,就可能阻止腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移,作為腫瘤研究的一個新

6、領(lǐng)域,抗血管生成治療已成為腫瘤研究的熱點。a n g i o s t a t i n 是新近發(fā)現(xiàn)的內(nèi)源性血管抑制因子,其蛋白質(zhì)療法顯著抑制了一系列腫瘤的生長,但存在療程延長、重復(fù)給藥、傳遞毒素及具有傳染陛顆粒、費用高昂等缺點?;蛑委熆梢员苊馍鲜鋈秉c并已成為腫瘤治療最有效的手段之一。為探討a n g i o s t a t i n 基因治療腦膠質(zhì)瘤的可行性,我們以陽離子脂質(zhì)體1 i p o f e c t i n 介導(dǎo)a n g i o

7、 s t a t i nc D N A 轉(zhuǎn)染c 6 膠質(zhì)瘤細(xì)胞,G 4 1 8 ( 1 0 0 0 “g /m 1 ) 克隆篩選,存活細(xì)胞定義為轉(zhuǎn)染組( C 6 - A g s tg r o u p ) ,P C R 、R T —P C R 及W e s t e r nb l o t鑒定a n g i o s t a t i n 表達(dá)。觀察a n g i o s t a t i n c D N A 對膠質(zhì)瘤細(xì)胞體外生長、增殖及凋亡的影響

8、,同時我們還進(jìn)行了抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞( h u m a nu m b i li c a l v e i n e n d o t h e l i a l ,H U V E ) 增殖實驗、抑制小鼠角膜新生血管生成實驗。結(jié)果發(fā)現(xiàn),經(jīng)G 4 1 8 篩選的轉(zhuǎn)染組膠質(zhì)瘤細(xì)胞,在D N A 、R N A 及蛋白質(zhì)水平均可檢測到a n g l o s t a t i n 的表達(dá)。C 6 - A g s t 組與c 6 組、C 6 - p R c組(

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