1、利用RT-PC擴增了PRRSV吉林分離株(JL)M蛋白基因，并對擴增序列進行了分析。結果顯示JL株M蛋白基因全長525bp、編碼175個氨基酸；與GenBank中己報道的PRRSV美洲型部分毒株相比，M蛋白基因核苷酸的同源性為91.4％-99.8％，推導的氨基酸序列同源性為92.1％-99.7％：遺傳進化分析表明，JL株M蛋白基因與BJ-4毒珠、VR-2332等毒株聚為一枝，屬于PRRSV美洲基因型；用DNAstar軟件對兒株M蛋白抗原

2、表位進行分析，發(fā)現(xiàn)其與BJ-4珠和VR-2332株差異不明顯，說明兒株與部分強毒株M蛋白有相似的抗原特性。 以感染性犬2型腺病毒全基因組為載體，構建了含有M蛋白基因的重組質粒pPoly-II-CAV-2．M。脂質體介導將重組基因組轉染MDCK細胞，獲得重組病毒，經(jīng)多酶切和PCR鑒定，表明獲得了含M蛋白基因的重組病毒CAV-2-M；對重組病毒CAV-2-M的遺傳穩(wěn)定性和M蛋白基因的轉錄和表達進行了檢測。結果表明，重組病毒在體外連續(xù)

3、傳代，性質穩(wěn)定，沒有出現(xiàn)外源基因的缺失和重排；重組病毒感染細胞后能夠穩(wěn)定轉錄和表達PRRSV M蛋白基因，具有良好的反應原性。 將重組病毒CAV-2-M采用肌肉注射接種20日齡仔豬，定期對受試動物血清進行檢測。結果顯示，重組病毒CAV-2-M能夠刺激機體產(chǎn)生針對M蛋白的特異性抗體，并可檢測到較微弱的中和PRRSV活性：同時對受試動物外周血進行了淋巴細胞增殖反應檢測，結果表明M蛋白可以特異地刺激受試動物淋巴細胞增殖。 本研