基于納米金的SERS及比色檢測的細菌生物分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、表面增強拉曼散射(Surface-enhanced Raman Scattering)是以拉曼散射為基礎建立起來的新型的光譜分析方法,由于其譜帶窄,靈敏度高,抗光漂白,抗水、玻璃等的干擾等的優(yōu)點,SERS在材料科學,表面科學,分析化學,生物學,醫(yī)學等研究中應用廣泛。本文圍繞細菌檢測展開研究,利用SERS技術和比色檢測技術,發(fā)展了一系列靈敏度高、操作簡便、反應快速的生物傳感器。本文主要的研究內容如下:
 ?。?)基于納米分子結的表面

2、增強拉曼光譜用于DNA的分析檢測【第二章】
  本章依據電磁場機理中的距離效應,即電場的強度隨著距離的增加而急劇降低,表現在拉曼染料離納米活性基底越近,其拉曼信號越強,發(fā)展了一種基于樹枝狀納米分子結信號放大技術的SERS傳感器用于靈敏檢測DNA。本文利用磁珠分選富集和完全互補的兩條DNA鏈之間的雜交作用力,驗證了通過層層自組裝形成納米分子結實現拉曼信號放大的可行性,使檢測到的SERS信號顯著增強,實現了DNA的靈敏檢測。
 

3、?。?)基于磁場誘導納米金聚集的SERS傳感器用于細菌DNA的檢測【第三章】
  本章是在上一章的基礎上,為克服上一章中所用到的雙修飾 DNA鏈價格昂貴和層層組裝困難的缺點,對其實驗原理作了改進,本章將拉曼染料5,5’-二巰基-雙(2-硝基苯甲酸)(DTNB)直接修飾在活性基底上,以細菌 DNA為模型體系探索了該方法的可行性。利用磁球的聚集作用誘使顆粒間距離縮短,產生了等離子體共振耦合效應,從而使得檢測的SERS信號顯著增強。結果

4、表明:在優(yōu)化條件下,在濃度為5pM到5nM這一范圍內拉曼強度與細菌DNA濃度的對數呈現較好的線性關系,并具有高選擇性。該方法設計簡單,花費低廉,能用于細菌DNA靈敏且有選擇性的檢測。
 ?。?)基于納米金的比色和SERS雙功能探針用于檢測以大腸桿菌為模型的革蘭氏陰性菌【第四章】
  本章建立了一種新型的以對氨基苯硫酚(PATP)標記的金納米顆粒為比色和SERS的雙功能傳感器用于以大腸桿菌 DH5α模型的革蘭氏陰性細菌的檢測。

5、通過金-巰鍵,PATP分子易修飾在金顆粒的表面,帶正電荷的PATP-AuNPs能夠通過靜電吸附的作用與表面帶負電荷的細菌結合。因為細菌的體積大約比顆粒大三個數量級,由于靜電吸附的作用,成千上萬的顆粒將會吸附在細菌的表面,導致了顆粒團聚,引起顏色從酒紅色變?yōu)樗{色。同時,P AT P也是一種拉曼活性染料,顆粒團聚所引起的等離子體共振耦合效應,使得其 SERS信號顯著增強。在比色檢測時,偏最小二乘法首次被提出來處理吸光度與細菌溶液濃度的線性關

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