1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文維甲酸Ro408757對人大腸癌細胞系CCL187的增殖抑制作用及其機制姓名：呂晶申請學位級別：碩士專業(yè)：細胞生物學指導教師：宋今丹2002.4.1／實驗材料I＼人大腸癌細胞系CCL187由美國哈佛大學Dana—Farber腫瘤研究所惠贈；Ro40—8757，由DrMieheMClaus(FH0脅鋤一hRochehd，Basle，瑞士)惠贈。實驗方法CCL一187用含10％小牛血清的DMEM培養(yǎng)液，37℃，100

2、％濕度，5％CO：溫箱單層傳代培養(yǎng)。Ro40—8757以DMSO配制濃度為10。2mol／L貯存液，一；O℃避光保存，用時用培養(yǎng)液稀釋成相應的濃度。將CCL一187細胞以3X103個／孔接種于4個96孔板上，培養(yǎng)24小時后，加入終濃度分別為3X10一、110一、310～、110～、3X10～moL／L的Ro40～8757各8復孔，并設(shè)8復孔對照，每隔3天更換藥物及新鮮培養(yǎng)液，分別培養(yǎng)3、69、12天后，用MTT法測定藥物對腫瘤細胞的增殖

3、抑制率。CCL一187加入終濃度分別為3X10一、l10～、310一、1X10～、310“mc眇L的Ro40一8757處理6天，并設(shè)一瓶對照組，對照組加等量的DMSO，倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)并攝影。CCL一187加入終濃度為1X10一m彬L的Ro40一8757處理3、69、12天，并分別設(shè)對照組，對照組加等量的DMSO，掃描、透射電鏡觀察細胞形態(tài)并攝影。單層培養(yǎng)的CCL一187細胞加入110～moL／L的Ro40一8757培養(yǎng)36、9、